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HIV实验室风险评估-doc4
HIV抗体初筛实验室风险评估报告
1.评估目的
获得性免疫缺陷综合症(AIDs))病原微生物实验室生物安全管理条例2实验室生物安全通用要求2.3人间传染的病原微生物名录WHO实验室生物安全手册艾滋病防治条例可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定分类等级在卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中将此列为第类病原微生物属能引起人,但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起危害的病原微生物。不同实验操作生物安全实验室级别要求根据《名录》的规定,可在BSL-2实验室进行。? HIV在病毒分类中属逆转录病毒科慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组。迄今为止,根据血清学反应和病毒核酸序列测定,全球流行的HIV可分为2 型:HIV 1型和HIV 2型。在HIV 1型内,根据编码包膜蛋白的env基因和编码壳蛋白的gag基因序列的同源性又进一步分为3个组:M组(主要组)、O组(外围组)和N组(新组或非M非O组),M组内又可分为A J10个亚型。在HIV 1型和HIV 2型之间,其核苷酸序列有45%的同源性,并且存在免疫交叉反应。应用免疫印迹法(West blot)可以将二者明确地区别开来。环境的稳定性:Env的变异率为千分之一。
4.4传染源:主要的是HIV携带者及AIDS患者。
4.5传播途径:主要通过传播传播传播。从HIV感染到出现艾滋病临床症状和体征的时间。平均潜伏期(50%的HIV感染者进展到艾滋病期的时间)为7年~8年。在感染后的一般需要2-12周,平均45天左右血液中才可检测到HIV抗体。从感染到机体产生抗体的这一段时间检测不到HIV抗体,医学称之为窗口期。在窗口期虽测不到HIV抗体,但若被感染,体内同样有HIV病毒,同样具有传染性。 HIV病毒侵入人体后,其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合,吸附到宿主细胞上;gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用,使病毒与宿主细胞膜更接近;gp41产生一系列构象变化,其N端的融合肽片段插入宿主细胞膜,导致病毒包膜与细胞膜的最终融合,病毒RNA进入细胞。在HIV感染后,最先能够监测到病毒RNA、然后是p24抗原,最后是抗体。在感染后的10~14 d内,病毒RNA水平是呈指数上升,随后下降并保持在持续稳定的水平上,进入HIV无症状期。p24抗原水平随着病毒RNA水平的发展而发展,在急性感染期就可以出现,被认为是病毒复制的间接标志,但由于检测方法的灵敏度不够而使得其检出时间要比RNA晚。从HIV感染到能够检测出HIV抗体这一时期,被称作“窗口期”。在窗口期,能够通过病毒RNA、p24抗原和CD4淋巴细胞水平来确定HIV感染。CD4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐下降,当其在血液中细胞下降到200个/mL时,就会发生严重的免疫缺陷,患者就被确诊为艾滋宿主范围:宿主范围较为广泛。诊断治疗预防临床表现实验室诊断HIV抗体检测检测HIV抗体是常规使用的HIV病原学诊断的方法。HIV抗体检测方法有初筛试验和确认试验组成。初筛试验结果阳性者再做确证试验以明确诊断。目前的HIV抗体检测都是使用新一代试剂,可同时检测HIV1型和HIV2型。初筛检测的方法有间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和金标法(SPOT),确认检测的方法为蛋白印迹试验(WB)。 医生一般会根据病人的感染史,如供血史、受血史、性接触史、吸毒、高危职业等结合临床体征对病人进行HIV检测。检测出HIV抗体的时间取决于HIV感染者的反应性和HIV病毒的特性,一般在感染后1—3个月出现HIV抗体。HIV抗体初筛结果阴性者或可疑者,半年后可进行第二次检测,但不需要多次检测。HIV抗体初筛结果阳性者,须进一步做确证试验。确证试验报告HIV抗体可疑的病人,应在3个月后进行复查。确证结果阳性者都具有HIV特异的带型,确认结果是可靠的。
P24抗原检测P24抗原检测是诊断早期HIV感染的一种方法。HIV感染者多数在感染1—3个月才出现HIV抗体,抗体出现之前的这个时期称为“感染后窗口期”。在窗口期,HIV抗体是检测不到的。P24抗原的检测有助于多数急性感染者血清HIV抗体阳转之前的诊断,大约可以使抗体窗口期缩短1周,因为估计检测P24抗原到检出P24抗体间隔只有1周时间。但由于不是所有新近感染的人都可以检出P24抗原,加上该项检测费用较高,所以一般不作为常规诊断项目。
白细胞和淋巴细胞检测医生对HIV抗体确认为阳性者进行临床分期或治疗时,才需要做一些辅助性实验室检查,如白细胞和淋巴细胞检测。 AIDS病人周围白细胞及淋巴细胞总数是下降状态,淋巴细胞的变化可用于评价机体免疫系统损害的程度,CD4值对于评价HIV感染的病期及预后极为重要,特别是病程后期更为重要。
(1)WBC、H
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