离子色谱简介及g2p样品检测20130307(王斌强).pptVIP

离子交换色谱简介及 G2P样品检测 王斌强 2013.3.3 如何分析检测以下物质？ 离子色谱基本原理 离子色谱中发生的基本过程就是离子交换，因此，离子色谱本质上就是离子交换色谱。离子交换色谱是基于离子交换树脂上可离解的离子和流动相中具有相同电荷的的溶质离子之间进行的可逆交换，根据这些离子对交换剂有不同的亲和力而被分离。 离子交换色谱示意图 离子交换色谱的固定相 离子交换树脂的网络骨架 离子交换树脂——活性基团 离子色谱使用的水与试剂 纯度尽可能高 G2P HPLC检测规程 仪器：岛津LC-10A RI检测器 色谱柱：CarboPac PA1 4*250mm （ Part No：035391）Dionex Corp Guard Column：holder CarboPac PA1，4*50mm （ Part No：043096） Frits，4mm，（Part No：42955） The CarboPac PA1 and PA10 are specialized anion-exchange columns designed to be used with pulsed amperometric detection to deliver high resolution separations of mono- and disaccharides. Both resins consist of 10-μm diameter nonporous beads covered with a fne latex of functional-ized MicroBeads? ,This pellicular resin structure permits excellent mass transfer, resulting in high resolution chroma-tography and rapid reequilibration. The CarboPac PA1 is a rugged all-purpose column suitable for determining monosaccharides and disaccharides in a variety of matrices. It is also the column of choice for high resolution separations of linear polysaccharides. 仪器与试剂 乙酸: ACS或分析纯 无水乙酸钠或乙酸钠：ACS或分析纯 高纯水 pH计 beta G2P标样 alpha G2P标样 磷酸氢二钠：ACS或分析纯 HPLC条件 流动相：100mM 乙酸钠，pH6.0。（2-8℃，保存1个月） 精确称取8.203g 乙酸钠或13.609g 三水合乙酸钠，加入1000mL高纯水溶解，用乙酸调pH为6.00±0.02，用0.45μm滤膜过滤，超声清洗仪中超声并抽真空2min。 进样量：称取G2P样品250mg于10mL容量瓶，流动相溶解并定容,必要时超声助溶, 用0.45μm滤头过滤, 进20μL. 流速：1mL/min 柱温：40℃或室温 运行时间：30min 检测器温度：40℃ 试验步骤 色谱仪接二通，流动相为高纯水，流速1mL/min冲洗色谱系统15min，期间用高纯水清洗进样器口并转动进样阀，反复切换检测器样品通道和参比通道清洗检测器。 接色谱柱，断开检测器（防止色谱柱中NaOH腐蚀检测器石英玻璃），冲洗色谱柱15min，流速由0.2mL/min逐渐增加到1mL/min。 换流动相为100mM 乙酸钠，平衡色谱柱20min, 接上检测器，平衡30min左右。 样品检测。依次进样品溶液，在初次分析，主峰及杂质位置无法确定时可用标样标定。 样品检测结束后，换流动相为高纯水，冲洗色谱系统25min，反复切换检测器样品通道和参比通道清洗检测器。 再换流动相为500mM NaOH溶液，断开检测器，冲洗色谱柱20min。 拆下色谱柱，拧上堵头保存。换高纯水，冲洗仪器15min，接检测器。 注意事项 色谱柱严禁遇水以外的有机相。 以上步骤为避免色谱系统残余有机相损伤色谱柱，冲洗时间均为最少时间，实际做样过程中视不同情况可延长。 参考色谱图 * * 离子色谱的基本流程图 淋洗液 泵 色谱柱 检测器 泵液 分离 检测 记录 F- NO3- SO42- Cl- NO2- Br- HPO42- 进样阀 抑制器 检测池 进样 离子交换树脂由三部分组成： ?? 固体载体：不溶性的三维空间的高分子网状骨架； 活性基团：以共价键连接在骨架上的活性官能团； 可交换离子：