IL-10对血小板衍生生长因子介导的肾小管上皮细胞E-钙黏蛋白和纤连蛋白表达的影响.pdfVIP

． 684． 查堕 !生 旦箜 堂箜 塑 !! ! JournalM!．2ol3，Vo1．34，No．5 JAK1signalingcooperatetocontrolactomyosincontractilityintumor [9] CHAUDHRYSI，HOOPERS，NYEE，eta1．AutocrineIL— cellsandstroma[J]．CancerCell，2011，20(2)：229—245． 1beta—TRAF6singallingpromotessquamouscellcarcinomainva一 [8] STUELTENCH，DACOSTABYFIELDS，ARANYPR，eta1． sionthroughparacfineTNFalphasignallingtocarcinoma—associa— BreastcaucercellsinducestmmalfibroblaststoexpressMMP一9 tedfibroblasts[J]．Oncogene，2012，[Epubaheadofprint] viasecretionofTNF—alphaandTGF—beta[J]．JCellSci， (收稿 日期：2012—04—13 编辑：朱绍煜) 2005，118(Ptl0)：2143—2153． IL一1O对血小板衍生生长因子介导的肾小管上皮 细胞 E一钙黏蛋 白和纤连蛋 白表达的影响 常颖 ，张兴平 ，梅枚。 重庆市第三人民医院老年科(400014)；重庆医科大学附属第一医院内分泌科(重庆400016) 摘【要】 目的 研究白细胞介素一10(IL一10)对人近端肾小管上皮细胞(HK～2细胞)在高糖环境下表达 E一钙黏蛋 白(E—cadherin)、纤连蛋 白(FN)及其相关途径的影响。方法 将 HK一2细胞作为靶细胞，用RT～ PCR法和Westernblot法检测血小板衍生生长因子(PDGF)的表达；用免疫细胞化学法和Westernblot法检测E— cadherin的表达；用ELISA法检测上清液中FN的分泌。结果 (1)在高糖环境下HK一2细胞表达E—cadherin减 少(免疫细胞化学法：90．12％，Westernblot法：91．70％)、FN增加 (452．94％)，同时PDGF表达增加 (RT—PCR 法：273．68％，Westernblot法：309．22％)，差异均有统计学意义 (P0．05)；(2)加入 l、5、25ng／mL的IL一10作用 后，HK一2细胞表达E—cadherin增加 (免疫细胞化学法：276．44％、364．67％、529．38％，Westernblot法：430．10％、 461．49％、677．60％)、FN减 少 (30．30％、42．51％、58．69％)，同时 PDGF表 达减 少 (RT—PCR 法：38．09％、 47．79％、54．32％，Westemblot法：20．62％、26．05％、44．40％)，与在高糖环境下比较比差异均有统计学意义 (P 0，05)。结论 IL一10可以抑制高糖环境下PDGF介导的HK一2细胞E—eadherin及FN的表达。 【关键词】 白细胞介素一10；肾小管；上皮细胞；血小板衍生生长因子；E一钙黏蛋白 白细胞介素 一10(interleukin一10，IL一10)是一种 京中杉)，Trizol(美国 Invitrogen)，通用型 RT—PCR试 免疫调节性细胞因子 ，它不仅能抑制细胞免疫反应和 剂盒 (日本 Takara)，DNAmarker(日本 TaKaRa)，聚合 促进体液免疫反应，而且对肾脏疾病也起着重要 的作 酶链反应引物(上海生工)，FNELISA试剂盒 (深圳晶 用。研究发现 IL一10能抑制。肾脏的炎症和纤维化过 美生物)。 程…。IL一10的这种作用是通过何种机制实现的目前 1．3 细胞培养及分组 HK一2细胞用含 10％FCS的 尚不明了。本研究拟探讨 IL一10对高糖诱导的肾小 DMEM培养液传代培养，培养条件为 37℃、5％CO，。 管上皮表达 E一钙黏蛋 白(E—cadherin)和纤连蛋白 以0．25％胰蛋 白酶消化细胞，接种于96孔 、12孔培养 (fi