LC3-Ⅱ和Beclin1在糖尿病脑缺血后处理大鼠海马CA1区表达及意义.pdfVIP

- 46 · 医学研究生学报 2016年 1月 第29卷 第 1期 JMedPostgra，Vo1．29，No．1。January，2016 论 著 (基础研究) LC3一II和 Beclinl在糖尿病脑缺血后处理大 鼠海 马 CA1区表达及意义 刘 宇 ，赵雅宁，刘孜卓，李建民 【摘要】 目的 糖尿病会使毒性物质在脑内蓄积、内源性保护性物质生成减少以及重要蛋白表达或活性改变。探讨糖 尿病对脑缺血后处理脑保护作用的影响及 自噬相关蛋白LC3一II、Beelinl在其中所发挥的作用。 方法 将80只雄性 SD大 鼠随机数字表法分为假手术组、全脑缺血再灌注组、脑缺血后处理组、糖尿病脑缺血后处理组，每组2O只。脑缺血后处理组大 鼠即采用改良Pulsinelli4血管阻断(4．VO)法制作全脑缺血再灌注大鼠模型，恢复再灌注前即刻给予再灌注 15s／，缺血 15S，重 复3次。糖尿病脑缺血后处理组组大鼠即采用链脲佐菌素 (STZ)诱导糖尿病模型，剩余同脑缺血后处理模型。造模成功后 1、 6、24、48、72h光镜下观察海马CA1区神经元细胞形态变化 ，免疫组化法检测 自噬相关蛋白LC3一II、Beclinl表达的变化。比较 脑缺血后处理对血糖正常大鼠与糖尿病大鼠海马 CA1区LC3一II、Beclinl表达的影响。 结果 HE染色结果显示，与假手术 组比较，其他3组大鼠海马CA1区神经元细胞结构破坏，各时间点存活神经元细胞数量下降(P0．05)；与脑缺血再灌注组比 较，脑缺血后处理组 、糖尿病脑缺血后处理组大鼠海马CA1区神经元细胞结构损伤减轻 ，各时间点存活神经元细胞数量明显 增多(P0．05)；与脑缺血后处理组比较 ，糖尿病脑缺血后处理组大鼠海马CA1区神经元细胞结构损伤加重，缺血再灌注 1、 6、24、48、72h存活神经元细胞数量明显下降[(124．24±2．63)／HP (104．27±2．18)／HP，(117．80-4-3．37)／HPvs(95．13± 4．22)／HP，(106．28±2．15)／HP s(82．84±3．31)／HP，(92．20±4．61)／HP (68．11±2．45)／HP，(71．14±3．94)／HP (60．99±2．11)／HP，P0．05]。免疫组化染色结果显示，与假手术组比较 ，其他3组大鼠各时间点海马CA1区LC3一II、Beclinl 表达增加 (表达变化为 1、6、24h表达量逐渐上升，24h表达到高峰，48、72h表达量逐渐下降)，与脑缺血再灌注组比较，脑缺 血后处理组、糖尿病脑缺血后处理组大鼠各时间点海马CA1区LC3一II、Beclinl蛋 白表达明显增加 (P0．05)；与脑缺血后处 理组比较，糖尿病脑缺血后处理组大鼠组缺血再灌注 1、6、24、48、72h海马CA1区LC3．II表达明显下降[(16．45±0．24)／HP (12．33±0．16)／HP，(24．88±0．45)／HPUS(19．70±0．61)／HP，(36．40±0．47)／HPYS(30．93±0．78)／HP。(31．36± 0．59)／HP (25．78--／0．80)／HP，(27．59±0．65)／HP s(22．21±0．21)／HP，P0．05]、Beclinl蛋白表达明显下降[(14．60± 0．43)／HPUS(9．42．4-0．34)／HP，(20．28±0．45)／HPVS(15．70±0．61)／HP，(30．404-0．47)／HP (24．934-0．78)／HP， (26．56±0．69)／HPvs(21．78±0．80)／HP，(23．89±0．38)／HP (18．21±0．21)／HP，P0．05]。 结论 糖尿病弱化了脑缺 血后处理的脑保护效应，其机制可能与下调 LC3一II、Beelinl表达有关。 【关键词】 LC3一II；Beclinl；自噬；脑缺血再灌注损伤；脑缺血后处理；糖尿病脑缺血后处理 [中图分类号】 R743．3 [文献标志码】 A [文章编号】 1008-8199(2016)01-0046-06 D【OI】 10．16571／j．cnki．1008．8199．2016．01．010 ExpressionandsignificanceofLC3-IIandBeclinlinhippocampusCA1followingcerebralischemicpost— conditioningindiabeticrats LIU Yu ，ZHAOYa．ning，LIU