JNK、P38-MAPK、IκB-α在异基因CD4＋T细胞致人脐静脉内皮细胞损伤中的表达及与TF的关系.pdfVIP

第 42卷第 5期第 515页 华 中科技大学学报 (医学版) Vo1．42 No．5 P．515 2013年 1O月 ActaMedUnivSciTechnolHuazhong 0ct． 2013 JNK、P38一MAPK、IKB一](c在异基 因CD4+T细胞致 人脐静脉内皮细胞损伤中的表达及与TF的关系* 韩 红 ， 黎纬明 ， 邹 萍 ， 樊晓武。， 黄 畦。 华 中科技大学 同济医学院附属协和医院血液病研究所 ，武汉 430022 华中科技大学同济医学院附属梨园医院 血液科 。心血管外科，武汉 430077 摘要 ：目的 检测磷酸化的c-Jun氨基末端激酶 (c-JunN—terminalkinase，JNK)、P38一丝裂原活化 的蛋 白激酶 (P38一 mitogenactivatedproteinkinase，P38一MAPK)、核转录因子抑制因子 (I~B-a)及组织因子 (tissuefactor，TF)，在异基因及 同基因CD4 T细胞与人脐静脉 内皮细胞 (humanumbilicalveinendothelialcells，HuVEcs)混合培养时在 HUVECs中 的表达 ，分析 JNK、P38-MAPK、I 与 TF的相关性，探讨 TF在异基 因造血于细胞移植急性移植 物抗宿主病 (aGVHD)血管内皮损伤中可能的作用机制。方法 体外原代分离培养 HUVECs，用人T细胞亚群阴性分离柱试剂盒， 从健康志愿者周 围血 中分离出CD4。。T细胞作为异基 因实验组，以同基 因CD4 T细胞为对照组，用 7干扰素预处理 HUVECs后与CD4 T细胞混合培养，分别在培养前及培养后不同时间点用流式细胞仪检测 HUVECs中TF抗原的表 达 ，实时定量 PCR检测 TF-mRNA基因的转录状况 ，Westernblot检测磷酸化 JNK、P38MAPK、IKB_a的蛋 白含量 。结 果 异基因组TF及磷酸化JNK、P38一MAPK、I~B-a的表达明显升高，与对照组在不同时间点比较差异均有统计学意义 (均 P 0．05)。相关性分析显示 ，TF与磷酸化 JNK、P38一MAPK表达呈正相关，而与磷酸化 I~B-a表达无相关性。 结论 TF可能通过 JNK、P38一MAPK信号通路参与异基因造血干细胞移植时 aGVHD血管内皮细胞的活化与损伤 。 关键词 ：c—Jun氨基末端激酶 ； P38一丝裂原活化 的蛋 白激酶 ； 核转录因子抑制 因子 ； 组织因子 ； 磷酸化 ； 混 合淋巴细胞反应 ； 急性移植物抗宿主病 中图分类号 ：R349．6 DOI：10．3870／j．issn．1672—0741．2013．05．003 ExpressionsofJNK，P38一MAPK andIKB—a inAllogeneicCD4+TLymphocyte-induced HUVECsInjuryandTheirCorrelationwithTissueFactor Han Hong ”，LiW eiming ，ZouPing etal InstituteofHematology，UnionHospital，TongjiMedicalCollege，Huazhong UniversityofScienceandTechnology，Wuhan430022，China 。DepartmentofHematology，LiyuanHospital，TongjiMedicalCollege，Huazhong UniversityofScienceandTechnology，Wuhan430077，China Abstract Objective Todetecttheexpressionsofc-JunN—terminalkinase(JNK)，P38一mitoge