miR-106b对HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Sep． 2013 Vo1．48 No．5 · 637 · doi：10．3969／j．issn．1671—6825．2013．05．017 miR．106b对 HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响 饶玉梅 △，陈 刚 ，李留霞¨，李秀芳¨，余静丽 1)郑州大学第一附属医院妇产科 郑州 450052 2)华中科技大学附属 同济医院妇产科 武汉 430030 △女 ，1974年 12月生 ，博士，主治医师，研究方向：妇科肿瘤 ，E—mail：raoyumei01@sina．COB 关键词 miR-106b；宫颈癌 ；HeLa细胞 ；顺铂 ；Twistl；PTEN；p-AKT 中图分类号 R711．74 摘要 目的：探讨 miR．106b对宫颈癌 HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法 ：采用实时定量 PCR检测转染 miR一106b抑制剂和类似物后 HeLa细胞中miR一106b的表达 ，MTT法及流式细胞仪检测转染后 HeLa细胞对顺铂 的 敏感性和凋亡 ，Westernblot检测细胞 中Twistl、PTEN、p-AKT(Ser473)蛋 白的表达。结果：miR一106b抑制剂可减少 HeLa细胞 中miR．106b的表达 ；而 miR一106b类似物可增加 HeLa细胞 中miR一106b的表达 。转染 miR．106b抑制剂 后 ，细胞对顺铂 的敏感性增强、凋亡及 PTEN蛋 白表达增加 ，Twistl、p-AKT表达降低 (P0．05)；转染 miR-106b类 似物后 ，细胞对顺铂 的敏感性减弱，凋亡及 PTEN蛋 白表达降低 ，Twistl、p-AKT表达增加 (P0．05)。结论 ：miR一 106b可能通过调节 Twist1、PTEN和 p-AKT的表达影响HeLa细胞对顺铂耐药 。 EffectsofmiR一106boncisplatinchemosensitivityinHeLacells RAO Yumei¨ CHENGang ，LILiuxia ，LIXiufang¨，YUJingli ， )DepartmentofObstetricsandGynecology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zheng- zhou450052 2)DepartmentofObstetricsandGynecology，TongjiHospital，HuazhongUniversityofSci— enceandTechnology，Wuhan430030 Keywords miR一106b；cervicalcancer；HeLacell；cisplatin；Twist1；PTEN；p-AKT Abstract Aim ：To exploretheeffectsofmiR一106b on chemosensitivity ofHeLa cellstocisplatin and itspossible mechanism．Methods：miR一106b inhibitorsandmimicsweretransientlytransfectedintoHeLacells，andtheexpressionof miR-106bwasdetectedbyreal—timePCR．Then，thedrugsensitivityofcellstocisplatincellapoptosisandtheexpression levelsofTwist1．PTEN andp-AKTweredetectedbyMTTassay，flow cytometryandW esternblot．Results：Theexpres— sionofmiR·106b wassignificantly decreasedafterthemiR一106b inhibitorstransfection，and increased afterthemimics transfectioninHeLacells．Moreover．knockdownofmiR一106bexpressiondramaticallyin