苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用.docVIP

　　苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用 ：邴飞虹 ，但汉雄，程静，韩俊，李婧，廖一帆 【摘要】 　　目的研究苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。方法苜蓿总皂苷提取物组高、中、低剂量分别为0.7，0.35，0.18 g·kg-1，阳性组：绞股蓝总苷片56 mg·kg-1，模型组：等体积蒸馏水，灌胃同时给予高脂饲料；对已造模的大鼠，按体重1.0 ml/100g灌胃，空白组：等体积蒸馏水，灌胃同时给予普通饲料；1次/d，连续给药90 d。检查血脂相关指标、主动脉病变情况、主要脏器组织的情况。结果苜蓿总皂苷提取物使大鼠的血脂相关指标、主动脉病变情况、重要脏器组织病变情况有不同程度的改善。结论苜蓿总皂苷提取物有抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。 【关键词】 苜蓿总皂苷提取物； 大鼠； 动脉粥样硬化； 降血脂 　　苜蓿为豆科植物紫苜蓿Medicago sativa L.或南苜蓿Medicago hispida Gaertn.的全草，是多年生草本植物。苜蓿总皂苷提取物不仅对于高脂血症有 治疗 作用，因其毒性低微，还可作为中老年人长期使用的保健品。苜蓿提取物在防治血脂代谢紊乱和抗动脉粥样硬化方面有其独到之处。本实验主要进行苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用研究，为该新药的临床试验提供实验依据。 　 　1 材料与仪器 　　1.1 受试药物苜蓿总皂苷提取物，批号：060828，061010，由广东省中山市中健药物研究所有限公司提供。用蒸馏水配制成36%，25%，14%的溶液，分别作为高、中、低剂量组，4 ℃保存备用。 　　1.2 试剂绞股蓝总苷片，由广州白云山和记黄浦中药有限公司提供，批号：E6A003，规格：每片含绞股蓝总苷20 mg，药片粉碎后加蒸馏水配成所需浓度，4℃保存备用；丙硫氧嘧啶片，由上海复星朝晖药业有限公司提供，批号：070901，规格：每片含丙硫氧嘧啶50 mg；维生素D3注射液，由上海通用药业股份有限公司提供，批号：080401，规格：7.5 mg/ml。总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)测定试剂盒，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒，批号分别为011M042、010M050，012L028，012L028，均由上海名典生物工程有限公司提供；TXB2、PG6-ket、ET放免分析药盒，批号分别为070820，070820，070820，均由北京北方生物技术研究所提供；胆固醇，由上海科瑞生物有限公司提供；戊巴比妥钠，由北京化学试剂公司提供，批号吐温80，由天津市标准科技有限公司提供，批号：070706；丙二醇，由湖北大学化工厂提供，批号：930801；蛋黄乳液，称取鲜鸡蛋黄15g加生理盐水配成75%的乳液；食用猪油，由宜昌双汇食品有限责任公司提供。 　　1.3 仪器Spctrumlab 53 po公司产品。GC-1200放射免疫计数器， 中国 科学 技术大学科技实业总公司中佳光电仪器分公司生产。80-2B型台式离心机，上海安亭科学仪器厂。 电子 精密天平，奥豪斯公司。恒温水浴锅，北京市医疗设备厂提供。g2+ -PAP法）的含量；并 计算 低密度脂蛋白（LDL-C）的含量和动脉粥样硬化指数（AI）。 　　分离主动脉，纵行切开，0.9%生理盐水冲洗干净，苏丹Ⅲ染色，照相，以百分率法算出斑块面积占动脉壁总面积的百分率，按分级法统计主动脉病变级别。计量资料以组间t检验进行统计比较，等级资料以秩和检验进行统计比较，百分率以卡方检验。主动脉斑块分级标准：0级-内膜表面光华，无奶油色变化，即无斑块；0.5级-内膜有广泛的奶油色或乳白色变化，但无凸出于表面的斑块；1级-有明显的奶油色凸起斑块，面积小于3mm2；2级-斑块面积大于3 mm2；3级-有许多大小不等的斑块，有的融合成片，大块的斑块面积超过3 mm2；4级-动脉内膜表面几乎为全为融合的斑块所覆盖。 　　主动脉用10%福尔马林溶液固定36 h后，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，在切片机上横断面制成5 μm厚连续切片。HE染色片随机选取10个视野测定主动脉内膜厚度，内膜/中膜厚度比值。 　　分离心脏，用10%的福尔马林固定，再将心脏横切成3块，每块冰冻切片至少2片，用苏丹Ⅲ及苏木素染色，每个切片一般都观察10个动脉断面并按下列标准分级：0级-动脉内膜无脂质浸润；0.5级-动脉内膜有轻度脂质浸润；1级-内膜斑块占血管腔面积的1/4；2级-内膜斑块占血管腔面积的1/2；3级-内膜斑块占血管腔面积的1/2以上；4级-斑块几乎堵塞整个管腔。 　　分离肝脏、肾脏，10%福尔马林溶液固定36 h后，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，在切片机上横断面制成5 μm厚连续切片，HE染色，镜检。