pokemon通过抑制p53和上调白细胞介素6抑制胃肿瘤细胞BGC823凋亡.pdfVIP

医堂 生学握 20l2年 11月第25卷 第 11期 JMedPostgra，Vo1．25。No．11。November。2012 ·1155 · 论 著 (基础研究) pokemon通过抑制p53和上调 白细胞介素6抑制 胃肿瘤细胞 BGC823凋亡 季玉连，赵树立，赵光峰，侯亚义 [摘要】 目的 原癌基因pokemon是转录抑制因子，高表达于多种肿瘤细胞中，但其在肿瘤发生发展中的机制仍有待阐 明。文中研究pokemon在 胃腺癌细胞系BGC823中的作用及机制。 方法 将pokemon的编码片段构建入真核表达载体pcD． NA3．1(+)中。将具有靶 向沉默pokemon的siRNA互补的DNA构建到pSilencer3．1H1．neo中。将构建的质粒 pcDNA3．1． pokemon和pSilencer3．1H1-3#用脂质体2000转染BGC823细胞。用流式细胞仪检测细胞凋亡，用 RT．PCR分析细胞内mRNA 的变化，用Westernblot检测pokemon蛋白的表达。 结果 成功构建了pokemon过表达／干扰载体pcDNA3．1-pokemon和pSi． 1encer3．1H1—3#。在BGC823细胞中，过表达的pokemon可显著抑制p53，促进白细胞介素6(尼_6)转录。干扰pokemon基因的 表达可使p53的转录增强。pokemon过表达可抑制 BGC823的凋亡，沉默pokemon表达可促进凋亡。 结论 pokemon抑制胃 肿瘤细胞BGC823凋亡 ，p53和儿_6是pokemon下游的靶基因。 【关键词】pokemon；p53；IL-6；细胞凋亡；BGC823细胞 [中图分类号】 R735．2 【文献标志码】 A 【文章编号】 1008—8199(2012)11．1155-05 PokemoninhibitstheapoptosisofgastriccancercelllineBGC823bysuppressingp53nadenhnacing／L-6 JIYu—lian ，ZHAOShu-li，ZHAOGuang—feng，HOUYa—yi， (1．LaboratoryofImmunologyandReproductiveBiology，SchoolofMedicine；2．StateKeyLaboratoryofPharma- ceuticalBiotechnology，NanjingUniversity，Nanjing210093，Jiangsu，China) [Abstract] Objective Theproto-oneogenePokemonisapotenttranscriptionalrepressorhighlyexpressedinmanykindsof cancels，butitsroleinthedevelopmentandprogressionofcancerremainstobeclarified．Inthisstudy，weinvestigatedtheroleof PokemoningastriccancercelllineBGC823naditsmechanism． M ethods Th ecodingsequenceofPokemonwasconstructedinthe eukaryoticexpressionvectorpcDNA3．1(+)，andaspecificsiRNAtargetingPokemonwasconstructedinpSilencer3．1H1一neo．The resultnatrecombinnatplasmidspcDNA3．1-pokemon andpSilencer3．1H1·#3weretransfected intotheBGC823 cellsusingLipo· fectamine2000．Th eapoptosisofthecellswasevaluatedbyflow cytometry，nadhtemRNA andproteinexpressionsofPokemondete