siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达及对细胞增殖影响的研究.pdfVIP

广西医学 2012年3月第34卷第3期 267 siRNA干扰乳腺癌 MCF-7细胞VEGF—C 表达及对细胞增殖影响的研究▲ 李 蓉 岑 洪 郭宝平 谭晓虹 (广西医科大学附属肿瘤医院化疗三科，南宁市 530021；E—mail：1974518@qq．eom) 【摘要】 目的 研究慢病毒载体介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞系血管内皮生长因子(VEGF—c)表达的 敲减作用及对乳腺癌增殖和凋亡的影响。方法 构建慢病毒VEGF—C／siRNA载体，转染乳腺癌MCF-7细胞，观察 其转染效率，采用实时定量PCR检测MCF-7细胞在转染前后VEGF．C的mRNA表达，计算VEGF—C敲减率，采用 四甲基偶氮唑蓝(MTr)法检测细胞增殖变化，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果 慢病毒VEGF—C／siRNA 转染效率超过80％，VEGF—C的mRNA表达敲减率达50％，MrIfII结果提示慢病毒VEGF—C／siRNA能有效抑制细胞 增殖，流式细胞学实验结果提示VEGF-C／siRNA干扰后S期细胞明显减少，G0／G 期细胞显著增加，细胞凋亡增 加。结论 慢病毒VEGF—C／siRNA转染率高，能有效敲减VEGF—C的mRNA表达，使细胞增殖受到抑制，凋亡增 加 。 【关键词】 乳腺癌；血管内皮生长因子C；RNA干扰；慢病毒载体；细胞周期 【中图分类号】 R737．9 【文献标识码】A 【文章编号】 0253-4304(2012)03-0267-05 Down-·regulationofVEGF-·CExpressioninMCF-7BreastCancerCeHsW ith Lentivirus-mediatedSmallInterferingRNA Vectorsand ItsEffectonCellProliferation Ⅱ 舶 ，CEN 舶 ，GUOBao-ping，TAN Xiao-hong (DepaamentofChemotherapy，AffiliatedTumorHospitalofGuangxiMedicalUnive~ity，Nanning530021，China) 【Abstract】 0bjective Tostudytheknockdownofvascularendothelialgrowthfactor—C(VEGF—C)expression ofMCF-7breastcancerceHsinterferedwith lentivirus—mediatedsmallinterferingRNA vectorsand itseffectoncell proliferationandapoptosis．Mehtods I_enfivims—mediatedsmallinterferingRNA vectorswereconstructednadtmnsdueted intoMCF-7breastcancerceUs．rea1．timePCRWas performedtodetectethemRNAexpressionofⅦ GF．C． proportionof transfectedceUsandtheknock．down rateofⅦ GF—Cwere calculatde ．ProliferationofcellsWas measuredbyMI’IIassay． rI1leapoptosisnadcellcycleWasanalyzedbyflowcytomotry(FCM)．Results rI1letransfeetionrateofMCF_7cells interferedwithlentivirus．mediatedsmallinterferingRNA wasmore山an80％ ．mRNA expressionofVEGF．Cdecreased bynearly50％ ．proliferationoftheVEGF．C／SiRNA ceHsWas inhibited．TheresultofFCM showedhtatlesscell