缺素培养对石竹幼苗的影响.docVIP

缺素培养对石竹幼苗的影响 摘要 用培法在苗期进行缺素（N、P）处理培养后对其生理指标进行测量，结果明：在不同缺素培养下叶片的丙二醛（）含量显著增加，产生的活性氧物质诱导超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性活性下降。 Dianthus chinensis,属于石竹科Caryophyllaceae)石竹属(Dianthus)。目前，植物在逆境条件下的膜脂过氧化反应和保护酶系过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化以广泛应用于植物对逆境机理的研究。石竹是一种观赏性很强的植物，也是城市、公园的绿化常用植物，现利用土培法，对石竹幼苗进行缺氮、缺磷培养，研究对其的脂质过氧化及酶活性进行研究，为石竹的栽培管理提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料 以沙子为培养基质的石竹幼苗为实验材料 1.2 方法 1.2.1 石竹幼苗的缺素培养 按照表1的配方分别配置完全培养液、缺氮培养液和缺磷培养液〔1〕。在石竹幼苗生根之后，定时等量的浇灌培养液，培养半个月。 表1 试剂名称 完全 缺氮 缺磷 KNO3 6.0 0 6.0 Ca(NO3)2 4.0 0 4.0 NH4H2PO4 2.0 0 0 MgSO4·H2O 1.0 1.0 1.0 KH2PO4 0 1.0 0 CaCl2 0 5.0 0 KCl 0.4 0.4 0.4 H3BO3 0.4 0.4 0.4 MnSO4·H2O 0.4 0.4 0.4 ZnSO4·7H2O 0.4 0.4 0.4 CuSO4·5H2O 0.4 0.4 0.4 H2MoO4(85%MoO3) 0.4 0.4 0.4 NaFeDTPA(10%Fe) 0.6 0.6 0.6 NiSO4·6H2O 2.0 2.0 2.0 Na2SiO3·9H2O 1.0 1.0 1.0 均加蒸馏水定容至1000 ml 1.2.2植物生理指标的测量 ①植物细胞质膜透性的检测。取实验组和对照组的石竹叶片，洗净擦干，分别量取0.3g；剪碎、研磨、过滤，将三种滤液等量的装入小试管中，增加一个等量蒸馏水的空白对照管，先测常温下的电导率值，再沸水加热10 min后测量电导率值。 ②石竹的丙二醛含量的测定。取0.3g的石竹叶片，剪碎，加入10%三氯乙酸（TCA））5支试管,分别编号(3支测定管,2支对照管)，按照表2的顺序加入试剂(3支测定管加酶液, 2支对照管加缓冲液），混匀后将1支对照管置暗处，其他各管于4000lx日光下反应15min（要求各管受光情况一致，温度高，时间缩短，低时延长）；反应结束后，以不照光的对照管作空白进行调零，分别测定其他各管的OD560nm吸光度。并记录好照光对照管的吸光度（ODC）和3支测定管的吸光度（ODS）。 表2测定SOD活性时各试剂加入量 试剂（酶） 用量/ml 终浓度（比色时） 50mmol/L磷酸缓冲液（pH7.2） 1.7 130mmol/L MET溶液 0.3 13mmol/L 750umol/L NBT溶液 0.3 75umol/L 100umol/L Na2-EDTA溶液 0.3 10umol/L 20umol/L 核黄素溶液 0.3 2.0umol/L 酶液 0.1 对照2支管以缓冲液代替 总体积 3.0 2 结果 2.1 植物细胞质膜透性 　由公式：相对电导率（%）＝（浸泡液电导率值－空白电导率值）/（煮沸后电导率值－空白电导率值）×100　可计算出的结果如表3，并由表3可得出细胞质膜透性由强到弱依次是完全培养液浇灌的石竹、缺Ｐ培养液浇灌的石竹和缺氮培养液浇灌的石竹。 表3 石竹提取液 浸泡液电导率值 煮沸后电导率值 相对电导率（%） 蒸馏水 60 62 完全 62 181 1.6807 缺N 63 121 5.0847 缺P 62 111 4.0816 2.2 丙二醛含量 由公式：MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 和 MDA含量(μmol/g FW)＝ 计算出的结果如表4，并有表4可知丙二醛含量由多到少依次是：缺Ｐ培养液浇灌的石竹、完全培养液浇灌的石竹和缺氮培养液浇灌的石竹。 表4 OD450 OD532 MDA浓度 (μmol/L) MDA含量 (μmol/g FW) 蒸馏水 0 0 0 0 完全 0.060 0.184 1.1532 7.6880 缺N 0.056 0.127 0.7878 5.2519 缺P 0.059 0.116 0.7152 4.7677 2.3 过氧化物酶（POD）活性 由公式：POD酶活力（U/(g*Fw*min)）=(△OD*Vt)/(0.01*