微囊藻水华对湖泊重金属形态含量及微生物群落结构影响的研究.pdf

目录 目录 摘要……………………………………………………．．I Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．II 第一章绪论…………………………………………………1 1．1研究背景……………………………………………．1 1．1．1蓝藻水华………………………………………．1 1．1．2痕量金属的地球化学循环…………………………．．1 1．1．3痕量金属污染现状…………………一……………2 1．1．4浅水湖泊金属污染水体和沉积物微生物的群落结构变化……3 1．2重金属地球化学循环及其生物有效性的研究方法………………3 1．2．1BCR法提取不同形态重金属…………………………．3 1．2．2 ICP—MS测定金属形态………………………………4 1．2．3微生物群落研究的分子生态学方法……………………4 1．2．4本研究主要采用的分子生物学方法……………………9 1．2．5本研究的主要内容、技术路线………………………．9 第二章微囊藻水华消亡对水体及沉积物中重金属形态含量及微生物T-RFLP的 分析……．………………………………………………．13 2．1前言………………………………………………．13 2．2材料与方法…………………………………………．13 2．2．1采样点样品的采集………………………………．．13 2．2．2 BCR法提取沉积物中不同形态金属。…………………．14 2．2．3ICP-MS测定重金属含量…………………………．．14 2．2．4水样中细菌基因组DNA的提取………………………．16 2．2．5沉积物中细菌基因组DNA的提取……………………．17 2．2．6 T-RFLP分析……………………………………．17 2．．2．7 T-RFLP数据分析处理……………………………．20 2。2。8细菌种群组成及变化的参数…………………………20 2．2．9细菌群落结构相似性分析…………………………．21 2．3结果与分析…………………………………………．21 2．3．1微宇宙体系水体及重金属理化指标的变化……………．．21 2．3．1微宇宙体系微生物群落结构T-RFLP分析………………28 2．3．3微宇宙体系细菌群落结构多样性指数分析……………．．33 2．4小结………………………………………………．36 第三章构建克隆文库研究微宇宙体系细菌群落结构的变化……………37 3．1前言………………………………………………．37 3．2材料与方法…………………………………………．37 3．2．1克隆文库所需片段的准备…………………………．37 3．2．2克隆建库和测序…………………………………．38 3．2．3测序结果的处理和分析……………………………39 3．3实验结果……………………………………………40 3．3．1克隆文库的构建和阳性克隆的筛选…………………．．40 3．3．2测序结果与已知序列的对比结果……………………．40 3．3．3克隆文库与T-RFLP方法分析结果的比较………………46 3．4小结………………………………………………．46 目录 第四章结论与展望…………………………………………．48 4．1研究的结论…………………………………………．48 4．2本研究的创新之处……………………………………．48 4．3研究展望……………………………………………49 参考文献…………………………………………………．50 参与课题和发表论文…………………………………………53 致{射……………………………………………………．．54