慢病毒介导fgl2基因沉默对心肌微血管内皮细胞Ang-1、Ang-2mRNA表达及细胞增殖、迁移的影响.pdfVIP

· 28 · 郑州大学学报(医学版) 2013年 1月 第 48卷 第 1期 doi：i0．3969／j．issn．1671—6825．2013．01．007 慢病毒介导 l2基因沉默对心肌微血管内皮细胞Ang-1、Ang-2 mRNA表达及细胞增殖 、迁移的影响 郑振中△，王 亮，吴友平，殷 然，王梦洪，郑泽琪，彭景添，魏云锋 南昌大学第一附属医院心血管内科 南昌330006 △男，1975年 8月生 ，博士，副教授 ，副主任医师，研究方向：冠心病 的防治和介入治疗 ，E—mail：greateful@ 163．corn 关键词 纤维介素2；短发夹 RNA；心肌微血管内皮细胞 ；血管生成素一1；血管生成素一2 中图分类号 Q782 摘要 目的：观察纤维介素 2(fgl2)基 因沉默对心肌微血管 内皮细胞(MMVECs)增殖、迁移及血管生成素一1、一2 (Ang一1、Ang一2)mRNA表达 的影响。方法 ：制作并包装人 fgl2RNA干扰慢病毒 fgl2一RNAi-LV。将细胞分为单纯 MMVECs组 (对照组)、GFP空载体慢病毒转染组 (GFP组)和 fgl2一RNAi—LV转染组 。稳定转染 4d后 ，应用实时定 量 RT．PCR法检测各组 fgl2、Ang一1和Ang．2mRNA的表达 ，MTT法检测细胞增殖 ，Transwell法检测细胞迁移能力。 结果 ：与对照组及 GFP组 比较 ，蟾12一RNAi—LV转染组 坫12mRNA表达 明显下调 (F=180．301，P0．001)，Ang一1、 Ang一2mRNA的表达 明显增加 (F=59．450和 54．572，P0．001)，MMVECs的增殖能力与迁移能力增强(F=5．341 和 6．122，P0．05)；对照组与 GFP组 比较差异无统计学意义(P0．05)。结论 ：fg12基 因沉默促进 MMVECs的增 殖、迁移 ，其分子机制可能与 Ang一1、Ang一2mRNA表达上调有关 。 Effectsoffibrinogen—-likeprotein2genesilencingonexpressionofAng--1 andAng一2mRNA ，proliferationandmigrationofmyocardialmicrovascu— larendothelialcell ZHENGZhenzhong，WANGLiang， Youping，y，ⅣRan，WANGMenghong，ZHENG Zeqi，PENGJing- tian．WEIYunfeng DepartmentofCardiology，theFirstAffiliatedHospital，NanchangUniversity，Nanchang330006 Keywords fibrinogen—likeprotein2；shorthairpinRNA；myocardialmicrovaseularendothelialcell；Ang一1；Ang-2 Abstract Aim：Toobservetheeffectoffibrinogen—likeprotein2(fg12)genesilencingonmyocardialmicrovascularen— dothelialceils(MMVECs)proliferationandcellmigrationandwhetherAng-1andAng一2involveornot．Methods：Wecon— structedalentiviralRNA interferencedvectorofhumanfg12gene．MMVECsweretransfectedbylentiviralvector．Fourdaysaf- tertransfection，quantitativereal—timeRT—PCR wasusedtodetecttheexpressionsoffg12，Ang一1andAng-2mRNA，MTT assay wasused todetectcellproliferation，andTranswellwasused todetectcellmigration．Results：Theexpression offgl