泛素水解酶22siRNA对宫颈癌CD133-＋宫颈癌干细胞增殖和侵袭的影响.pdfVIP

第 37卷 第 1期 中山大学学报 (医学科学版) V0l_37 No．1 2016年 1月 JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2016 泛素水解酶22siRNA对宫颈癌CD133+宫颈癌干细胞增殖和 侵袭的影响 靳 荣 ，李红芳 (1．天津市第五中心医院妇产科，天津 300450；2．兰州市第一人民医院妇产科，甘肃 兰州730050) 摘 要： 【目的】采用USP22siRNA对宫颈癌CD133+CaSki宫颈癌干细胞进行基因治疗，观察其对USP22含量和对增 殖侵袭能力的影响，并对其分子生物学机制进行初步探讨。 【方法】流式分选获得 CD133CaSki宫颈癌干细胞，分为USP22 组、阴性对照(NC)组、空白对照组(MOCK)组。采用westernblot法比较各组细胞 USP22蛋白的含量 ，M33法检测 3组细胞的 增殖能力，Transwell法检测3组细胞的侵袭能力，荧光素酶报告基因实验检测3组细胞Wnt／B—catenin信号通路的活性。【结 果】采用流式细胞术分选CD133阳性细胞后CaSki细胞CD133阳性率为 (96．87±5．31)％，显示流式分选宫颈癌干细胞成功 (P0．05)。Westernblot检测结果显示，USP22组CD133+CaSki细胞中USP22蛋白表达量明显降低。MTr结果显示USP22组 细胞增殖能力明显减弱 ，差异具有统计学意义(P0．05)。Transwell实验结果显示 USP22组CD133CaSki细胞侵袭能力明显 受到抑制 ，差异具有统计学意义(P0．05)。荧光素酶报告基因实验结果显示，USP22组Wnt／3[一catenin信号通路的转录活性 明显降低，差异具有统计学意义(P0．05)。【结论】USP22siRNA有降低CD133CaSki宫颈癌干细胞内Wnt／13一catenin信号 通路活性的作用 ，进而可以实现对宫颈癌干细胞增殖和侵袭功能的抑制 ，该治疗方法有望成为宫颈癌基因治疗的新手段。 关键词 ：微小RNA；宫颈癌干细胞；细胞增殖 ；细胞侵袭 ；泛素水解酶22 中图分类号：R737．33 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2016)01—0048—06 EffeetofsiRNA USP22onProliferationandInvasionofCD133+CervicalCancerStem Cells JINRong，LIHongfang2 (1．DepartmentofObstetricsandGynecology，TianjinFifthCentralHospital，Tianjin300450，China； 2．DepartmentofObstetricsandGynecoloyg，FirstPeople’SHospitalofLanzhouCity，Lanzhou730050，china) Correspondingto：JINRong，E-mail：jin．rongO815@163．com Abstract： 【objective】 CD133CaSkicervicalcancerstemcellstransfectedbyUSP22siRNA，observethecontentofUSP22 anditseffectonproliferationandinvasion，anditsmolecularmechanismsarediscussed．M【ethods】FlowsortingobtainCD133CaSki cervicalcancerstemcellsweredividedintoUSP22group，negativecontrol(NC)groupandblankcontrol(MOCK)group．Western blotwasusedtocomparethecont