液相色谱-质谱联用仪作业指导书.docVIP

液相色谱-质谱联用仪 1　范围 本作业指导书适用于新安装、使用中和修理后的离子阱和四极杆（包括三重四级）两种类型LC-MS的校准，四极杆—飞行时间串联等其它类型台式LC-MS的校准可参照此作业指导书进行。 2　引用文献 下列文献所包含的条文，通过在本指导书中的引用而构成本指导书的条文。本指导书发布时，所示版本均为有效。所有标准、规范或规程都会被修订，使用本指导书的各方应探讨使用下列文献最新版本的可能性。 JJF1001-1998《通用计量术语及定义》 JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》 JJ1164-2006《相色谱-质谱联用仪校准规范》 联用仪联用仪技术指标 要 求 质量范围 1000 u 质量准确性 ± 0.6 u 分辨力（R）* ≤1 u 信噪比* 正ESI 10 pg利血平S/N≥10：1 负ESI 0 pg氯霉素S/N≥10：1 正APCI 0 pg利血平S/N≥10：1定量重复性RSD≤10% 注：1 标*的为必须校准项目 2 本技术指标仅供参考,不作为合格性判断依据 5　校准/测试条件 5.1 实验室环境要求 5.1.1 仪器室内不得有强烈的机械振动和电磁干扰，不得存放与实验无关的易燃、易爆和强腐蚀性气体或试剂。 5.1.2 实验室温度：20℃～30℃。 5.1.3 相对湿度：≤70％。 5.2 标准物质与试剂 5.2.1 利血平-50%乙腈水溶液：100.0 pg/μL； 5.2.2 利血平-50%乙腈水溶液：10.0 pg/μL； 5.2.3 氯霉素-50%乙腈水溶液：200.0 pg/μL； 5.2.4 氯霉素-50%乙腈水溶液：20.0 pg/μL； 5.2.5 碘化铯钠-异丙醇水溶液：2 μg/μL碘化钠，50 ng/μL碘化铯溶于50%异丙醇水溶液； 5.3 标准设备 5.3.1 微量注射器：10 μL 6　校准/测试项目与校准/测试方法 6.1外观检查 6.1.1仪器应具有下列标识：名称、型号、制造厂名(或公司名)、出厂编号，并附使用说明书。 6.1.2仪器主机、色谱仪、计算机、真空部件和检测器等完好(符合出厂说明书要求)，各部件连接正确，各插件紧密配合，接触良好，仪器启动后无异常噪声。 6.1.3仪器的按键开关、各调节旋纽均能正常工作，无松动现象，指示灯显示正常。 6.1.4仪器运行中使用的高电压、大电流和高温等应在仪器的显著部位贴有警示标志，提醒操作者注意这些潜在危险。 6.1.5仪器应标明使用电压和频率等。 6.2 分辨力 仪器稳定后，选择ESI正离子模式，采用手动调谐，将碘化铯钠溶液 直接注入质谱中，参照附录D均匀选择5个扫描质量，优化仪器至最佳状态，记录各目标离子峰得到半峰宽W1/2。 6.3 质量范围 参照6.2条件将碘化铯钠溶液通过进样泵直接注入质谱中，选择Scan模式，设定扫描范围为（20~2000）m/z，观察是否出现质量数1000以上的质谱峰。 6.4 质量准确度 参照6.2条件，将碘化铯钠溶液通过进样泵直接注入质谱中，记录133，323,473,623,922,1072等碘化铯钠主要离子的质量数，理论值见附录D，根据公式（1）计算质量准确度 (1) 式中——第i个离子三次测量平均值，u； ——第i个离子理论值，u。 6.5 信噪比 6.5.1 正ESI源 仪器稳定后，将100pg/ul的利血平溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子609至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。 调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C或等效色谱柱分离，注入10pg利血平溶液，选择SIM模式，提取特征离子，根据公式（2）计算信噪比。 (2) 式中：——提取离子的峰高； ——基线噪声。 6.5.2 负ESI源 仪器稳定后，将200pg/ul的氯霉素溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子321至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。 调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C或等效色谱柱分离，注入20pg氯霉素溶液，选择SIM模式，提取特征离子，根据公式（2）计算信噪比。 6.5.3 正APCI源 仪器稳定后，将100pg/ul的利血平溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子609至最佳响应后记录参数并保存调谐文件。 调谐完毕后根据调谐文件设定参数，以50：50乙腈水溶液为流动相，使用C或等效色谱柱分离，注入20pg利血平溶液，选择SIM模式，提取特征离子，根据公式（2）计算信噪比。 6.6 测量重复性 参照6.5.1条件，注入200pg/ul的；利血平溶液10ul，选择SIM模式