心肌型脂肪酸结合蛋白新近研究进展OK.docVIP

关于心肌型脂肪酸结合蛋白研究进展【】? 急性心肌梗死（AMI）的发病率及死亡率均很高，现代治疗学认为，AMI发病后能迅速得到确诊并进行再灌注治疗，对于降低死亡率及改善预后十分重要。迄今为止,临床应用的检测指标如肌钙蛋白I(cTnI)、心肌型肌酸激酶同工酶（CKMB），在AMI发病后的早期（２ h～４ h）阳性率不高；肌红蛋白（MB）虽出现较早,但特异性较差。心肌型脂肪酸结合蛋白（heart fatty acid binding protein,HFABP）是近些年推出的心肌标志物，受到业界重视，对其性质、测及在心肌损伤中的应用作。【关键词】?心肌型脂肪酸结合蛋白急性心肌梗死 脂肪酸结合蛋白（FABP）它们，种FABPs都有不同的表达模式这些蛋白有多种功能，包括促进细胞摄取和运输脂肪酸，寻找参与特殊新陈代谢途径的脂肪酸，参与基因表达和细胞生长的调节。首先由Ockner等在1972年研究大鼠的小肠脂肪酸吸收的调节时，于肠粘膜发现的一族同源性的小分子细胞内蛋白质。分子量为12～16KD，广泛分布于哺乳动物的小肠、肝、脂肪、心、脑、骨骼肌等多种细胞中。在同一细胞中可分布多种FABPs，例如在小肠内皮细胞上存在两种不同FABPs，即L-FABP和I-FABP，二者具有29％的同源性。在植物中也发现有FABP。不同型FABP的序列有较大的同源性。H-FABP是一种可溶性细胞质蛋白，分子量为14～15KD。它特异、大量存在于心肌组织中，约占心脏全部可溶性蛋白的4%-8%，正常人每克湿重心肌中含H-FABP约（0.52±0.06）毫克。H-FABP是一种酸性蛋白质，其等电点（pI）为5.1。人H-FABP的一级结构由132个氨基酸组成，其中还有多个苏氨酸和赖氨酸，缺少半胱氨酸，在其N末端有一个乙酰化的缬氨酸残基。心肌型脂肪酸结合蛋白能够与疏水性配体分子如长链脂肪酸、维生素（视黄醇）、视黄酸、某些有机阴离子等发生特异性结合，是关键的脂肪酸载体蛋白。它可将脂肪酸从细胞质膜向发生酯化和氧化的部位运输，从而进入线粒体的能量代谢体系之中，使脂肪酸在此氧化分解并最终生成三磷酸腺苷（ATP），并提供能量。H-FABP特异地存在于心肌组织中。正常人的血浆和尿中不含有H-FABP，或含量甚少。H-FABPH-FABP与心肌细胞内作为能源的难溶性长链脂肪酸以及脂酰辅酶A（acyl-CoA）的疏水部分相结合，起着将上述物质从细胞质膜向脂化和氧化部位运输的作用。血流中乳糜微粒和极低密度脂蛋白释放出的脂肪酸通过细胞表面的脂肪酸转运蛋白进入细胞内后，被H-FABP摄取并转运至线粒，从而进入能量代谢体系并最终生成三磷酸腺苷（ATP），为心肌收缩提供能量。 检测 1. 夹心酶免法（Sandwich ELISA） 1997年Panteghini等［4］采用9FABP125单克隆抗体和鸡多克隆抗体联合HRP标记的鼠抗鸡IgY单克隆抗体，进行双抗体夹心ELISA法测定HFABP。本法批内CV＜15%，最低检出线0.5 μg/L,与其他心肌、骨骼肌蛋白、肌红蛋白、肌浆球蛋白、肌钙蛋白无交叉反应。用该法测定35名健康人血清中HFABP水平为0.5 μg/L～2.8 μg/L，正常参考值上限为10 μg/L。北京大学生命科学院率先在国内完成HFABP ELISA法测定试剂的研制工作［5］。Tanaka等[6]建立了血浆和尿中的H－FABP竞争性酶免疫分析法，但测定需时较长，不适合临床应用。Wodwig等[7]建立了一步法ELISA，测定需时45min，其敏感性和特异性与Okhura等[8]的二步法ELISA一致。此两法现均有商品供应且已用于临床。 2. 时间分辨免疫荧光测定法（TRIFMA） 时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）是自80年代以来新发展起来的一种新型分析技术，与其它免疫分析技术相比，有其独特的优点。时间分辨荧光免疫分析具有灵敏度高、特异性强、所用试剂有良好的稳定性、检测限较宽、尤其是能消除常规荧光测定中的高背景等优点，是非放射免疫分析中很有发展潜力的分析方法[]。服了放射性免疫分析法（RIA）中放射性同位素带来的污染问题；克服了酶免疫分析法（EIA）中酶不稳定的缺点；而且，由于TRFIA法能够很好的消除背景荧光的干扰，使其灵敏度比普通荧光法（FIA）高出几个数量级。正是由于TRFIA的独特优点，使得它成为免疫分析中最有发展潜力的一种分析方法。时间分辨荧光免疫分析的原理就是使用三价稀土离子（如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+）作为示踪物，通过这些稀土离子与具有双功能结构的螯合剂以及抗原形成稀土离子-螯合剂-抗原螯合物。当标记抗原、待测抗原共同竞争抗体，形成免疫复合物，由于免疫复合物中抗原抗体结合部分就含有稀土离子，当采取一些办法将结合部分与游离部分分开后，利用