吸烟合并慢性牙周炎患者龈沟液NO含量检测.doc

吸烟合并慢性牙周炎患者龈沟液NO含量检测【摘要】 目的 检测吸烟的慢性牙周炎患者牙周基础治疗前后龈沟液内NO含量，与不吸烟患者的进行比较，结合牙周炎临床症状的改善情况，探讨吸烟与牙周炎的关系。方法 在口腔内科门诊选取患有慢性牙周炎患者20例，随机分为吸烟组和不吸烟组。在牙周炎治疗前后分别采集龈沟液标本，免疫荧光法检测龈沟液NO含量进行分析，同时记录牙周炎临床症状的改善程度。结果 两组经牙周基础治疗后NO含量均有明显下降，吸烟者的含量显著高于不吸烟者，牙周炎临床指标的变化表明吸烟者治疗前后的变化显著小于不吸烟者。结论 吸烟与导致牙周炎相关且影响牙周炎的治疗效果。 【关键词】 一氧化氮；龈沟液；慢性牙周炎 作者单位：163001 黑龙江省大庆油田总医院口腔科 一氧化氮(NO)是机体内重要的信使分子和效应分子，参与细胞信息的传递、介导细胞免疫和炎症毒性作用［1］。慢性牙周炎的病理改变是牙槽骨的破坏和吸收［2］。其发生机制主要是长期慢性炎症导致的血管调节功能失控，使局部血流动力学发生改变，导致局部牙槽骨组织血流量下降，造成局部骨代谢的失调［3］。而NO在此过程中发挥重要作用。吸烟是牙周炎的高危因素，可通过多种途径对牙周组织产生影响［4］。在此检测吸烟合并慢性牙周炎患者基础治疗前后龈沟液内NO含量的改变，结合牙周炎临床症状的改善来探讨吸烟与牙周炎的关系。 1 材料与方法 11 主要试剂与材料 Whatman3#滤纸条(2 mm 10 mm,3 m)；NO免疫荧光试剂盒(biovision，美国)；BP211 d万分之一电子天平(德国Sartorius公司)；D37520离心机(美国Thermo公司)；时间分辨荧光读数仪(Wallac Victor2，美国)。 12 实验方法 121 病例选择 在大庆油田总医院口腔内科门诊选取20位以《牙周病学》(3版人民出版社)标准确诊患有广泛性慢性牙周炎患者，全口牙中有附着丧失和骨吸收。所有患者均无其他全身代谢性疾病，近3个月内没有服用过任何抗生素或激素类药物，半年内未接受过牙周治疗。妇女无妊娠。将20例患者随机分为吸烟组和不吸烟组。吸烟标准为每天吸烟10支以上或吸烟时间三年以上。所有患者均知情同意。 122 基础治疗前后牙周临床指标的检测 使用牙周探针对各组牙周炎进行牙周检查，每名患者选取双侧上下前后牙各一颗，记录牙周探诊深度(PD)、附着丧失(AL)，探诊出血(BOP)等。所有患者第一次就诊先进行口腔卫生宣教后施以必要咬合调整、龈上洁治术，牙面进行抛光。一周后复诊进行龈下刮治术、根面平整术。所有临床检查均由同一位医生完成。治疗过程中避免外源性高浓度亚硝酸盐的给入。吸烟者始终保持吸烟习惯。牙周基础治疗后4周复诊，再次检查上述PD、AL、BOP等指标。 123 龈沟液样本的采集 在基础治疗前每名患者仍选取上述双侧上下前后牙，清水漱口，吹干牙面，棉卷隔湿，用4条Whatman3#滤纸条分别插入取样每牙的颊腭(舌侧)、近中、远中牙周袋内，留置60 s后取出。将每颗牙的4条滤纸条作为1个样本，密封在液氮中保存待测试。牙周基础治疗后4周按同样方法采集龈沟液样品保存。 124 NO含量的检测 将装滤纸条的冷冻液从液氮中取出放入4℃冰箱中解冻，在每一个试管中加入300 μl三蒸水将4条滤纸条完全浸没，3000r/min 10 min离心后将滤纸条丢去，保留上清液于4℃冰箱。采用NO免疫荧光检测试剂盒，按说明书进行操作，按所给公式换算出每个样本中硝酸盐和亚硝酸盐浓度，得出NO的浓度。 13 统计学方法 采用SPSS 115统计软件包进行统计分析，实验组与对照组计量资料的差异采用单因素方差分析或两独立样本t检验。基础治疗前后临床指标的差异采用重复测量数据的方差分析，P005 40±04 36±04 P005 35±09 24±07 P005 53 26 P005 22 牙周基础治疗前后龈沟液NO含量比较。 表2 吸烟组和不吸烟组基础治疗前后 NO含量比较(μmol/L, x±s) 测量时间 NO 吸烟组 不吸烟组 治疗前 721±213 533±128 治疗后 501±06 137±021 P值 P001 P001 3 讨论 正常人口腔内产生的NO是由L精氨酸在一氧化氮合酶的催化下生成L瓜氨酸时释放的。一些研究已证实NO对维持口腔内正常菌群的平衡以及抗微生物感染有直接影响。同时，适量的NO对牙周组织的健康及功能的正常发挥起着重要作用［5］。在牙周炎症状态下，血管内皮素的含量显著增高，NO的水平相应增高来对抗血管内皮素所造成的牙周组织小血管及微血管的强烈收缩，