超临界流体色谱自制.ppt

3.温度的稳定性 ? 因为超临界流体的密度是与柱温直接有关，故要求柱温控制精度要高，保证温度的稳定性。 ? 4.安全保护 在使用超临界流体n-C5时，如有渗漏，当炉子加热丝变红时，就会引起爆炸，故要求炉丝设计，在最高温度时，电热丝不产生橘红色，并注意安全保护。 1.4.4?阻力器 ? 为使超临界流体在整个色谱柱分离过程中始终保持为流体状态，当用FID、NPD、FPD、MS时，在色谱柱出口和检测器之间，需要一个阻力器（或称备压调节器），以保证色谱柱的出口压力缓和地降至大气压，当用紫外、荧光检测器时，因其本身可在高压下操作，故可在检测器出口接阻力器降压，阻力器大致分为三类，即直管型、小孔型和多孔玻璃型阻力器。下面分别进行简单的介绍。 1.直管型阻力器 ? 直管型阻力器，是由一根内径5-10?μm 石英毛细管组成，长度根据需要确定。这种阻力器结构简单，可由细管长度决定阻力大小。但非挥发性物质易凝结而使喷口阻塞，易产生毛刺而使样品“失真”。 ?  ? 2.小孔型阻力器 小孔型阻力器，可以单独做成，亦可作为石英毛细管的一端，做成整体阻力器，使用方便，效果较好。 3.多孔玻璃型阻力器 ?此种阻力器是由多孔二氧化硅烧结制成的，是Lee公司据专利生产的。在内径100?μm 烧结玻璃（或陶瓷）构成。全长约20cm，一端由对接连接器与毛细管柱相连，另一端接FID，使用方便，效果好。 1.4.5检测器 在超临界流体色谱中由于流动相具有惰性和流体性质，因此可接LC的光度检测器，而 流体流出了色谱柱可减压成气体，故可接大部分GC检测器，尤其是氢离子火焰检测器。流动相这些特性，使GC和LC检测器在 SFC中得以通用，使其可利用的检测器大为扩展。其中最重要的检测器是高灵敏度的通用型GC检测器FID，其次是LC检测器紫外和荧光检测器。实际过程中，检测器的选择要考虑不同的流体和检测方法的匹配问题。 1.氢离子火焰检测器 ? 氢离子火焰检测器（FID）因其死体积小、响应快，是接毛细管柱SFC的理想检测器。 但是要作为SFC的检测器要求其稳定性更好、灵敏度再提高。由此Lee?Scientific公司推出新的FID设计，采用新的筒状收集电极，力求把全部产生的离子收集下来，可以显著提高检测器的效率；采用废气防空限流法，使火焰稳定性提高，噪声降低。FID的检测限达 10-13g/s。为使满足超临界流体气化时大量吸热，使高分子物质气化，FID具有大的加热器，并保持在350-450℃。但FID属于破坏型检测器，有些场合并不适用。 ? 2.紫外和荧光检测器 紫外和荧光检测器是LC常用的检测器，它们在SFC中也很重要。当用正己烷、正戊烷等作流动相，或在超临界流体中添加改性剂梯度洗脱时，氢离子火焰检测器不能使用，只能采用紫外和荧光检测器。在SFC中，紫外和荧光检测器是非破坏型检测器，因此可以用来制备微量样品或制备色谱。 3.其他检测器 ?氮磷检测器（NPD）是测定含氮有机物的选择性检测器，可用于药物及氨基酸分析。双火焰光度检测器（FPD）是一种高灵敏度、高选择性的测定有机硫和有机磷化合物的检测器。这种检测器能够消除大量烃类对测定硫和磷的干扰。射频等离子体检测器（RPD）是一种高灵敏度、高选择性的多元素光谱检测器，有很好的发展前景。微波诱导等离子体检测器、无线电频率等离子体检测器、及ICP检测器可用于金属有机化合物的检测，在SFC中也被广泛采用。电流检测器、电子捕获检测器及激光散射检测器等都作为检测手段在SFC中得到良好应用。 ? 1.4.6超临界流体色谱联用技术 ?　 色谱-光谱联用技术仍是当今较为活跃的研究领域，其中联用最多的包括SFC/MS联用SFC/FRIT联用及SFC/NMR联用。超临界流体萃取-超临界流体色谱法联用技术（ 　SFE-SFC）。 ? 1.5超临界流体色谱的应用 超临界流体色谱正处在研究、发展阶段，超临界流体色谱的应用也处在开发、推广时期。近年来，超临界流体色谱技术的发展速度较快，发表的研究论文日渐增多，商品化仪器也增长较快。SFC以其独特的有点应用于药物分析，对映体拆分，食物和天然药物、生物分子、炸药、农药和化工产品等的分析。近来，模拟移动床式制备型SFC的出现拓宽了SFC的适用范围和生产规模。 应用与示例 超临界流体色谱法已被广泛应用于天然物，药物，表面活性剂，高聚物，农药，炸药，火箭推进剂等物质的分离与分析. 1.超临界流体色谱法测定怀牛膝制剂中齐墩果酸的含量 牛膝制剂中含有的齐墩果酸不易挥发，且含有羟基、羟基等相性基团，用GC法测定须衍生化处理后，才能测定，又因其结构中无发色团，本自无紫外吸收，也不易被激发产生荧光，若用HJPLC测定无法用常规检测器检测，而用SF