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病理技术质量控制常见问题研究摘要：目前，病理诊断主要依赖最基础的传统的石蜡切片和H-E染色，所以把这一经典的本领掌握好，一套完善的病理技术质量控制和质量保证体系至关重要，故本文就病理切片及染色的质量控制常见问题及质控措施作一分析探讨。 关键词：病理切片；染色；质量控制；质控措施 【中图分类号】R472 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2012)05-0127-01 病理技术从原始的刀耕斧种、钻木取火工作状态逐渐发展到目前的实验室工作的机械化操作，从单一病理切片的H-E染色和免疫组织化学染色到现代高尖端的分子技术的飞速发展，但是病理诊断主要还是依赖于传统的石蜡切片和H-E染色。所以，把经典的本领掌握好，对于临床诊断的及时性、准确性至关重要。其中，一套完善的病理技术质量控制和质量保证体系有着举足轻重的作用，故本文就病理切片及染色的质量控制常见问题作一分析，并提出相应的质控措施。 1 病理切片常见问题及质控措施 1.1 组织固定和取材:常见问题为：以淋巴组织为主的各种组织如果固定不及时或者固定不当，则会引起自溶，导致核质着色较浅，轮廓不清，并且有程度不等的条状发白区现象。取材时，组织块过大或过厚均会导致固定液渗透不均匀，组织块易发生变形。如果组织周围脂肪过多，容易导致脱水不良，从而切片困难。 质控措施为：标本无论大小，离体后30min内应该马上固定，给予足够的固定液量。最好固定24h后再取材，组织块应大小适中，厚薄、形状规则一致，尽量清除组织周围多余的脂肪组织。 1.2 脱水试剂及包埋:常见问题为：脱水试剂无论是中性甲醛固定液还是乙醇、石蜡使用一段时间后，会挥发或者混杂其他杂质，导致浓度降低，组织固定、脱水、透明、浸蜡会受到影响，降低切片质量。如果浸蜡温度过高，会致组织收缩而变硬变脆，不利于切片。新购的包埋石蜡往往含有气体，不容易与组织融合。如果包埋面出现错误，则在显微镜下往往观察不到全层的结构。 质控措施为：定期更换脱水试剂，最好用乙醇比重计测量乙醇浓度。脱水后，组织要经过2次以上的二甲苯透明与石蜡浸透，以置换组织中的乙醇，浸蜡的石蜡熔点为56～58℃。将包埋石蜡溶解后放置于65℃温箱内3～5d，或将石蜡加温、冷却，反复几次后，使气体蒸发，包埋石蜡的温度要比浸蜡温度高约3～5℃，包埋要迅速，包埋时把所需的病灶组织向下，对皮肤、肠管、囊壁要垂直包埋，如此可保证各层组织结构都能被观察[1]。 2 染色质量控制常见问题 组织切片及染色常见问题：蜡块固定不牢、切片机固定不紧，切片出现横皱纹；切片机螺丝松动会产生振动，组织切片往往薄厚不均；如果烤片温度太高，时间太长，则会出现组织“焦糊”现象，但温度低、时间不足，染色时却易发生脱片，在染色过程中出现掉片情况，主要有以下几种原因：①切片太厚；②烤片时间短；③玻片脏；④特殊组织如血块等情况。切片刀不锋利，切片时会自行卷起或皱起。组织切片脱蜡不净，切片上留有少许未脱尽的石蜡，致苏木素-伊红染色时不着色；组织切片出现苏木素染色欠佳，伊红易褪色；苏木素染色后，以盐酸乙醇分化切片，分化后流水冲洗的时间太短，组织切片长期保存会褪色。染色后片子出现染色不良和背景脏的情况，染色不良其主要原因是因为片子脱蜡不净留有残存蜡所致[2]。 质控措施为：维护切片机，旋紧切片机上的各个零件和螺丝；选择锋利无缺口的切片刀，保证切片质量。烤片时烤箱温度应为65℃，烘烤30min左右为宜。对于切片脱落的问题，处理方法是片子不要切得太厚，一般为3～5微米，适当延长烤片时间，一般半小时左右，烤片台温度控制在70～75℃为好。玻片使用之前用酸清洗一下，或使用免清洗的玻片。如遇特殊组织如宫腔内血块组织、腺体组织和淋巴组织要尽可能切得再薄一些，3微米为好。染色时应根据苏木素染色液的新旧、室温高低，掌握染色时间。可在100mol伊红水溶液内加一滴冰醋酸，起促染作用。切片分化应在显微镜下控制染色深浅，分化后须流水冲洗30min，去除残留酸，以利切片长期保存。对于染色不良问题，应及时提高室内温度和延长组织在二甲苯的时间，或者更换新的二甲苯，这样可解决染色不良。背景脏则是由于苏木素本身易氧化在其表面形成一层氧化膜，这层膜粘附在片子上所致，处理方法很简单就是在使用前过滤一下即可。 病理组织切片制作从组织的固定、取材、脱水到包埋、切片、染色等一系列程序，要求技术人员必须细心、耐心，且具有高度责任心，任何环节出现问题都会影响到切片质量，从而影响病理医生的正确诊断。病理技术人员应充分了解仪器设备的性能及使用说明，是正确使用仪器、规范操作的必要条件，技术员要做到对仪器的定期保养与维护，保证仪器设备能在最佳状态下工作。其次，高素质技术人员的规范管理及仪器设备的规范管理