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透射电镜电子染色方法的改良 improvement of staining method for transmission electron microscopy
第29卷第2期 电子显微学报 V01—29.No.2
2010年4月 ofChineseElectron 20lO旬4
Journal MicroscopySociety
文章编号:looO击28l(2010)02旬189旬2
透射电镜电子染色方法的改良
孟 丽1,崔 芳1,龚 淼2,武惠珍3
(河北医科大学1.电镜实验中心,2.组胚教研室,3.实验诊断教研室,河北石家庄050017)
摘要:为提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率。在传统染色方法基础上进行改良,使用自制染色装置,在
较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。与传统方法相比较省时省药,减少污染机率,电镜观察的超
微结构清晰,反差较好。
关键词:透射电镜;电子染色;方法改良
中图分类号:Q336文献标识码:A
随着电镜技术的不断推广发展,选择透射电镜 内上下提洗100次晾干,铀染色结束。此方法能一
对生物样品进行观察分析日益增多,样品制备的工 次完成对40张铜网的染色,仅需染液3mL,并能在
作量也随之加大。这就要求实验人员必须使用一套 同一时间内清洗完毕,既省时又省药。
能在较短时间内完成大批样品染色的方法。通过反
2枸橼酸铅染色
复试验,作者在传统电子染色方法基础上,利用现有
的材料进行改良,设计出一套简易快捷的电子染色 优点:染色环境密闭,流水冲洗减少污染机会。
方法。现介绍如下。 材料:密封盒,氢氧化钠,齿科蜡片,橡胶引流
管,三通管,一次性吸管。
1醋酸铀染色
(1)将氢氧化钠倒入密封盒内l/2左右,放人
优点:省时省药。 红蜡片制成铅染色盒(此盒可反复使用,定期更换
材料:样品盒,称量瓶,缝衣线,白蜡块 氢氧化钠)。
000
(1)把透射电镜样品盒根据日常工作量的大 (2)将u型玻璃三通用橡胶管接于5ml的
小,用齿科打磨机磨成大小不同圆形染片盒,周围要 下口瓶上,把两个一次性吸管尖端剪去,另一端劈开
留左右对称的缺口,绕线使用。每个网格底部打一 与玻璃三通上的玻璃滴管对接起来,制成洗片架
巾2mm左右小孔以铜网不掉出为宜。便于染液穿 (图2)。
过和清洗(图1)。 (3)把引流管切成lcm的段,从中间劈成两个
(2)将白蜡块融化倒人称量瓶内,凝固后根据 半圆,并编号。在其凹陷处划一道缝,不要划透以防
自制染片盒的大小厚度用蜡刀雕刻一圆槽(此称量 染液渗漏。将染完铀后的铜网夹在胶管缝隙内放入
瓶可反复使用,使用后用蒸馏水冲洗晾干待用)。 密封盒,滴铅染液,置30℃温箱。
(3)把线从片盒第一个孔穿过并打结,按顺序 (4)30min后将胶管逐一放在自制洗片架上,
放入待染的铜网,再将线依次从缺口绕过平行勒住 冲洗1.5min,晾干,透射电镜观察。
铜网至最后一圈打结。 结果表明此方法能在较短的时间完成大批样品
(4)将装好的片盒放入称量瓶的蜡槽内,滴入 的电子染色工作,而且电镜观察的超微结构清晰,反
铀染液,盖上瓶盖。而后避光放入30℃温箱。30差好,获得满意结果(图3)。
min后用镊子取出染片盒,
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