高磁性与无磁性趋磁细菌的获得及磁小体释放技术研究.pdfVIP

实验与技术 EXP ER IM EN T T EC HN OL O GY 高磁性与无磁性趋磁细菌的获得及磁小体释放技术研究 张宇红1 ,2 , 肖　天1 ( 1. 中国科学院 海洋研究所 海洋生态与环境科学重点实验室 , 山东 青岛 26607 1 ; 2 . 中国科学院 研究生院 , 北京 100864) ( ) 摘要 :利用特殊的磁富集传代法获得高磁性和无磁性 A MB1 菌株 。通过透射 电子显微镜 T EM 观察和 Cmag 值测定 ,对这两种菌株进行了验证 。优选了条件 ,使高磁性 A MB1 菌株在培养 192 h 后出现 自溶现 象 ,磁小体从细胞内释放出来 。 关键词 : AMB1 ;纳米磁小体 ;磁小体释放 中图分类号 :Q93 　　　　　文献标识码 :A 　　　　文章编号 (2009) 02000 104 ( ) 　　趋磁细菌 magnetot actic bact eria 是一类能够 A TCC ,菌种编号 A TCC700264 。 沿磁力线运动的特殊细菌 ,广泛分布于世界各地[ 1 ] 。 1 . 2 　培养基 ( 由于体内有纳米级磁性晶体称为磁小体 magneto 蒸馏水 1. 0 L ,Wolf es 无机盐混合液 5 . 0 mL , so me) , 自从 1975 年被美国科学家 Blakemore 发现 [2 ] Wolf es 维 生 素 混 合 液 10 . 0 mL , 奎 尼 酸 铁 以来 ,受到了科学家们的广泛关注 。趋磁细菌在 环境中需要微好氧条件[3 ] ,且营养类型属于化能 自 0 . 02 mmol ,0 . 1 % 刃天青 0 . 45 mL , 磷酸二氢钾 养[4 ] ,营养条件要求苛刻 ,使得 目前能够纯培养的菌 0 . 68 g ,硝酸钠 0 . 12 g ,琥珀酸 0 . 74 g ,L半胱氨酸 株数 目很少 , 自然环境中的很多趋磁细菌虽然在显 0 . 05 g ,蛋白胨 0 . 2 g ,酵母提取物 0 . 1 g 。Wolf e’s 无 微镜下被观察到[ 5 ] ,但是在实验室中难以分离纯化 , 机盐混合液与 Wolf es 维生素混合液配方参照文 只有少数菌株得到纯培养[ 6～8 ] ,致使对趋磁细菌的研 献[ 16 ] 。p H 值 6 . 7 。 究常受到实验材料限制 。 1. 3 　AMB1 光密度值的测定 有报 道 认 为 磁 小 体 的形 成 是 由基 因 岛控 制[9～13 ] ,为了研究磁小体的形成机制 ,通常用基因敲 分光光度计波长调至 600 nm ,以蒸馏水调零 ,取待 除的办法获得缺陷型 , 并与野生型对 比进行研究 。 测菌液 3 mL 放入分光光度