华山松疱锈病检疫技术的初步研究.PDFVIP

维普资讯 森林病虫通讯 1994年 第3期 华山松疱锈病检疫技术的初步研究 杨佐盅 金德强 粟安全 乐国富 王兴旺 — — — 一 — — — — — — ～ 四川省森林扁虫甜怕检痘总站 成都 6100~1) (ml川者广元市#业 局) (四川省南江县国营林场) l、 57 ；’7 、 ，1摘要 以人I接种 的华山松带疫 实生苗和 自然感病立本为材料 ，用植精显微化学方 法从 自配或改。制的24种染色液配方中，垃两个发病年度的匆选、复选及再选试验，得到j ． 以革胺兰、番缸花虹、亮茸、孔雀石嫜及苯酚品缸等为主要原料的染荆配方。用它们检测华 山松罹 病组织 中的松疤锈病菌Cronartium ribicola具有特异性强、分色性好、配方简单、 使用方便、快速准哺午优点，便于基屠检疫人员掌握应用 关键词 华山松 疱锈病．检捌碡 ～ — 华 山凇 疱锈病 Crona~tium ribicOlaJ．C． 管 ，试剂瓶 ，刀片 ，蒸馏水等 。 FischerexRabenhorst属五针拴疱锈病类 ，是 2．染色剂配方设计及筛选 华山松的一种毁灭性病害，国内森林植物检疫 染色剂配制：以上列常规试剂及药品配制 对象。由于该病潜育期长，病原菌不能人工培 出包括迪纳 氏染色液 “。、苯胺兰染液、番红花 养，早期诊断难度较大。迄今，对该病的检疫诊 液、乳酚兰液，Giemsa液等在 内的 15种细胞 断方法有症状学和组织染色两类．其中，症状诊 核、细胞质、细胞壁及细胞膜类染色剂 ．与 断法仅在发病季节适用，颇受时间限制，不能满 改铡及 自行设计的 9种染色剂为基础配方。 足植物检疫工作快速、准确的需要，常用Giem— 试验材料：锈子器盛发期的 5—6月，在广 sa染剂检测罹病组织中的菌丝体分色性差 ，特 元市天台林场采集罹病华山松树干部锈子器发 异性不强，难于识别，操作繁杂，不便推广应用。 生部位的新鲜病皮 ，经 TAA 固定液处理 2— 本研究从生产实际出发 用植物显徽化学方法 24hr后备用 。 对 自配和改制的多种染色剂配方和染色方法进 筛选方法 ：用试前配制的24种染色剂按切 行反复测试，综合评定，汰选出特异性强 分色 片一 (媒染)一 (水洗)一染色一水洗 (或脱水、脱 性好、快速准确的疱锈病菌检测方法，并对疱锈 色)一 (浮载剂)一镜检的程序逐个对带疫材料 病 菌的寄生特点及分布范围进行了测定，为疱 作组织染色试验 。1992发病年度的多次重复比 锈病的科学治理和检疫检验提供了理论依据 。 较试验 ，初选 出分色性好 、特异性强、结果稳定 的配方及操作简单的染色方法，于 1993发病季 一 、 材料及方法 节对其灵敏度和准确性作进一步测试验证．经 综合评定 ，汰选 出最佳染色剂及染色方法 。