高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响.docVIP

高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响 李昆 郭鑫 杨芸 李薇 王超 宋富强 呼永河* 中国人民解放军成都军区总医院中心实验室，成都市，610083 [提要] 目的 观察高湿环境对肝脏异柠檬酸脱氢酶（IDH)与α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDHC）含量的影响。方法 SD大鼠随机分为常温常湿对照组、高湿环境20、30、40天组，采用人工气候箱模拟高湿环境，条件设置为温度25℃、相对湿度90-95%RH，实验组大鼠每天置于箱中10小时，其余时间与常温常湿对照组饲养于清洁环境（温度22-26℃，相对湿度40-60%RH）。酶联免疫法（ELISA）检测指标。结果 高湿环境20天，肝脏IDH、α-KGDHC及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化。高湿环境30、40天，肝脏IDH含量分别降至常温常湿对照组的75.98%和79.90%（P＜0.05），α-KGDHC含量分别降至常温常湿对照组的80.00%和81.01%（P＜0.05）；血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58%和23.33%（P＜0.01）。病理切片显示高湿环境40天大鼠肝脏点状坏死灶增多。结论 高湿环境可致肝组织三羧酸循环关键酶含量及氧化磷酸化效率降低，糖酵解活跃，血乳酸升高，机体内环境发生相应改变，导致不适及损害。( [关键词] 高湿 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸脱氢酶 乳酸 自然环境与人类生存和活动密切相关，特殊的环境气候条件会对机体产生多方面的影响，诱发机体不适和相应的病理生理改变。高湿作为一种极端气候环境，当湿度大于60%以上，机体各器官功能将产生各种反应和病理改变[1，2,3]。为探讨高湿环境下机体能量代谢功能的变化，本研究利用人工气候箱模拟高湿环境，观察大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH)与α-酮戊二酸脱氢酶（α-ketoglutarate dehydrogenase，α-KGDHC）的改变，现将实验结果报告如下。 1. 材料与方法 1.1 实验动物与分组 采用3-4月龄清洁级健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物许可证号：scxk(川)2008-24），体质量180±10克，随机分为4组，每组8只动物。 1.2 动物模型制作 选用多段编程人工气候箱（型号：RXZ-1000A-zl，中国宁波江南仪器厂）模拟高湿环境，设置高湿环境模拟条件：温度为25℃、相对湿度90-95%RH，大鼠置于箱内每天10小时后，取出置清洁环境中饲养，分别持续20、30、40天。常温常湿对照组饲养于清洁环境，环境条件：22-26℃，相对湿度40-60%RH。动物模型制作完成后，乙醚麻醉，采取腹主动脉血、肝组织标本分别检测。 1.3 仪器及试剂 Thermo Multiskan GO全波长酶标仪，岛津 UV2450紫外-可见分光光度仪。采用武汉伊莱瑞特生物科技有限公司生产的酶联免疫检测试剂盒，南京建成科技有限公司生产的血乳酸测定试剂盒测定相关指标。 1.4 统计分析 实验结果以平均值±标准差（X±SD）表示, 采用SPSS13.0统计分析软件，各模型组与常温常湿对照组比较采用单因素方差分析，以P0.05为差异显著。 2. 结果 2.1常规病理切片观察：与常温常湿对照组比较，除高湿40天组肝脏局部点状坏死灶增多外，其余各组肝脏汇管区、肝细胞板结构、肝窦及其细胞成分、中央静脉等均无显著形态学改变(见下图)。 常温常湿对照组（×40） 高湿环境20天组（×40） 高湿环境30天组（×40） 高湿环境40天组（×40） 2.2 肝脏IDH、α-KGDHC含量及血清乳酸变化：高湿环境20天，肝脏IDH、α-KGDHC及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化。高湿环境30、40天，肝脏IDH含量分别降至常温常湿对照组的75.98%和79.90%（P＜0.05）；肝脏α-KGDHC含量分别降至常温常湿对照组的80.00%和81.01%（P＜0.05）；血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58%和23.33%（P＜0.01）（见表1）。 表1 肝脏组织IDH、α-KGDHC含量及血清乳酸变化（n=8） 组别 异柠檬酸脱氢酶 IDH （ng/mg蛋白） α-酮戊二酸脱氢酶 α-KGDHC（ng/g蛋白） 血清乳酸 LD（mmol/L） 常温常湿对照组 1.353±0.237 592.81± 95.48 4.419±0.329 高湿环境20天组 1.376±0.204 565.26± 68.92 4.875±0.479 高湿环境30天组 1.028±0.249▲ 474.22± 67.84▲ 5.947