黑大蒜提取物对小鼠细胞免疫功能影响.pdfVIP

一、摘要 中文论著摘要…………………” 英文论著摘要…………………· 二、英文缩略语…………………… 三、论文 前言……………………………………… 材料与方法………………………………………………………………………·10 实验结果…………………………………………………………………………15 讨论…………………………………………………………………………………………………………18 结论…………………………………………………………………………………………………………19 1 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………2 五、参考文献…………………………………………………………………………22 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………23 在校期间科研成绩………………………………………………………………·37 致谢…………………………………………………………………………………………………………38 个人简介…………………………………………………………………………·39 其它的一些生理功能紊乱，人们在实验中还发现其具有降血脂、降血压、降血糖、 抗肿瘤、抗菌、抗氧化和免疫调节等功效。大蒜来源的有机硫化合物对一些人类 肿瘤，如前列腺癌，胸腺癌，结肠癌，肺癌，膀胱癌等有很好的抑制作用。大蒜 的化学组成十分复杂，其中有生物活性的成分超过100种。其中最重要和最独特 的是有机硫化合物的含量非常高，是其他含有高硫的蔬菜如洋葱、椰菜的4倍多。 近年来日本学者发现在控制湿度和温度的情况下，普通的白大蒜可以经过处理转 化为黑大蒜。黑大蒜去除了大蒜的异味，带有甜味，口感好，无需再经处理即可 直接食用。已有研究报道黑大蒜较白大蒜含有更多的氨基酸、有机硫和S．烯丙基 ．L．半胱氨酸，因此与白大蒜相比，更具有应用前景。然而目前有关黑大蒜对机体 免疫功能影响国内外尚未见报道。为此，本实验应用自制的黑大蒜提取物溶液， 腹腔注射给小鼠，观察了黑大蒜提取物作为免疫调节剂的作用，为黑大蒜的实际 应用进一步提供理论和实验依据。 实验材料 一、主要试剂 1640培 黑大蒜提取物(干粉，由日本弘前大学佐佐木甚一教授惠赠)，RPMI M 养基，小牛血清，O．0lPBS缓冲液，红细胞裂解液，LDH底物液，Griess试剂， ELISA试剂盒。 IL．2、玎附吖、IL．4、TNF．a 二、实验动物 BALB／e小鼠，6．8周龄，SPF级，购自中科院上海实验动物中心。 黑大 蒜提 射后的1—7天，从第1组开始，每天处死一组小鼠，第8组小鼠于第7天处死。 二、样品的采集与检测 1、脾细胞分离及其悬液的制备 颈椎脱位处死小鼠，常规制备脾细胞悬液，调整细胞浓度至1x107／ml。 IFN-),以及Th2细胞因子IL．4的水平 3、LDH释放法检测NK细胞的杀伤活性 4、Griess法检测脾细胞培养上清中NO水平 5、RT．PCR半定量技术检测脾细胞FasLmRNA的表达水平 三、统计学处理 著性差异。 结 果 1、NK细胞杀伤活性的检测结果 在连续5天给予BALB／c小鼠注射黑大蒜提取物后，比较实验组和对照组小 鼠的NK细胞杀伤活性，结果表明：与对照组(5．824-1．38％)相比，黑大蒜提取 物处理4-6天后，实验组小鼠的NK细胞杀伤活性显著性升高，并在第5天达到 峰值(11．214-1．17％)，随后下降。 2、脾细胞培养上清中细胞因子水平的检测结果 IL-4的分泌水平。我们发现在给予小鼠连续注射5天黑大蒜提取物后，IL．2的分 2 泌的在组3(照但 从黑大蒜提取物处理后的第3天到第7天，实验组小鼠N02。始终处于较高 的水平，与对照组相比(11．58+0．86州)，