滋养层细胞囊泡与奶牛低品质胚胎共移植对受胎率的影响.pdfVIP

中国畜牧兽医 2009年第36卷第8期 遗传繁育 ·79· 滋养层细胞囊泡与奶牛低品质胚胎共 移植对受胎率的影响 佟桂芝，韩永胜，丁昕颖 (黑龙江省畜牧研究所，齐齐哈尔 161005) 摘要：将奶牛低品质胚胎与囊胚滋养层细胞囊泡(trophoblasticvesicles，TRV)共移植，TRV来源于体外受精培养7d、体 内培养7d囊胚的囊胚滋养层细胞。胚胎移植受体牛超声波妊娠诊断共进行2次，即发情的第26～43天和第38～73天。第 无显著差异。两组间受体牛的妊娠期和后代出生重相似。 关键词：奶牛低品质胚胎；TRV；共移植；妊娠率；妊娠期；出生重 中图分类号：S813 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2009)08—0079—03 目前，胚胎移植作为家畜改良及纯种扩繁的有 娩率及犊牛出生重的影响。 效手段，正在被广泛普及应用。但是胚胎移植妊娠率 l材料与方法 低，成本高是制约其产业化的主要因素，所以如何降 1．1 C级奶牛胚胎 胚胎来源于荷斯坦奶牛超数 低成本、提高胚胎妊娠率是迫切需要解决的问题之 排卵第7天获得的常规胚胎。经形态鉴定后的C 一。家畜的妊娠是一个复杂的过程，它通过胚胎与 级致密桑葚胚和囊胚。 子宫之间建立的妊娠识别信号进行信息传递。干扰 1．2受体牛受体牛为发情周期正常的健康荷斯 素～tau(INF-r)是由囊胚滋养层细胞囊泡(tropho— 坦奶牛母牛，处于发情周期的第7天(发情第1天为 blastic vesicles，TRV)分泌的，是反刍动物胚胎附植 0d)。 前发出的特有的妊娠信号，是建立母体妊娠识别的 1．3 TRV的制备 核心因子(Roberts等，1999；Mayer等，1995；Martal 1．3．1 卵母细胞体外成熟 从屠宰场收集牛卵巢 等，1997)。INF—r具有抗溶黄作用。在维持黄体功 放入灭菌生理盐水中，冲洗后，用注射器抽吸直径 能、妊娠建立中发挥重要的生物学功能。jNF-r基为2～8mm卵泡中卵母细胞。回收卵丘细胞完 因的表达具有发育阶段特异性，表达高峰期在孵化 整、卵胞质均匀的卵丘细胞一卵母细胞复合体 囊胚至胚胎附植于子宫内膜之前。一旦胚胎与子宫 (COCs)，洗涤3次。放入平衡好的成熟培养液滴 阜建立组织学联系，INF—r基因表达就终止。由于 中，在38．5℃、5％CO。、饱和湿度培养箱中成熟 其表达时间与母体妊娠识别的时间非常吻合，因此 培养22～24h。 被认为是胚胎向母体发出的最初妊娠信号(Stojk— 1．3．2 体外受精胚胎生产 成熟卵母细胞移入 ovic等，1995)。如果胚胎在要求时间内不能产生足 B0受精液中备用。细管精液38℃水浴解冻30S， 够的INF—r，子宫内膜就不能充分与INF—r反应，因 置于精子洗涤液中，离心后吸去上清，调整精子密度 而可能导致反刍动物早期妊娠失败(Takahashi等， 2000)。在胚胎移植过程中，由于C级胚胎分泌的 (BO液+10BSA)中。吸50弘L精液移入 mg／mL INF．r少，所以加入囊胚滋养