126例梗阻性无精子症借助ICSI治疗临床结局分析.docVIP

126例梗阻性无精子症借助ICSI治疗临床结局分析作者单位：330006 江西省妇幼保健院辅助生殖中心 通讯作者：伍琼芳 【摘要】 目的 探讨梗阻性无精子症采用不同方式获取的精子对卵胞浆内单精子注射术（ICSI）治疗的妊娠结局。方法 根据获取精子的方式不同将梗阻性无精子症患者分为两组：TESA组46例、PESA组80例，两组患者均行ICSI治疗。比较两组受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率及临床妊娠率等。结果 TESA组与PESA组的卵裂率分别为88.2%和94.2%，优质胚胎率分别为62.2%和62.5%，两组比较差异均无统计学意义（P0.05）。两组受精率分别为72.1%和77.6%，种植率分别为23.3%、34.8%，临床妊娠率分别43.1%、68.7%，两组比较差异均有统计学意义（P0.05）were found.However, fertilization rate，implantation and clinical rate of pregnancy is respectively 72.1% vs 77.6%,23.3% vs 34.8%,43.1% vs 68.7%, and then significant difference（P 1.3.2 TESA 消毒麻醉同PESA操作，术者左手固定睾丸，绷紧阴囊皮肤，用7号静脉头皮针连接5 ml注射器，预先抽吸少量培养液，在睾丸中部无血管区进针，保持针尖在睾丸组织内并做来回穿刺动作，助手与术者来回穿刺动作同步抽吸5 ml注射器，直至术者感觉头皮针阻力较大时，保持注射器负压抽出带有曲细精管的针尖，并用显微镊子尽可能拔出更多的曲细精管，按压穿刺点2 min，助手将曲细精管挑入预置培养液的培养皿中，洗去红细胞，在解剖显微镜下用两个无菌BD注射器将曲细精管撕碎，在倒置显微镜下检测精子情况。 1.4 精子悬液的制备 1.4.1 附睾精子的处理 将穿刺所得附睾液加入离心管，操作时应尽可能不打混精液与离心液的界面，尽可能避免将附睾液中的红细胞混入沉渣里，以防影响随后的ICSI操作。然后用适量G-IVF液（ Vitro life, Sweden ）冲洗盛有附睾液的小皿，再缓缓加入离心管，尽可能获得多的精子，1500转/min，15 min。弃上清，将沉渣用巴士德吸管转入洗精液里，1500转/min，5 min。由于附睾穿刺获得的精子数量和活力都有限，且直接行ICSI治疗，因而不需上游。洗涤后即可备用。制作ICSI操作皿，放入37 ℃、6.5% CO2培养箱内孵育，待行ICSI。 1.4.2 睾丸精子的处理 先准备一个小皿，用针头在小皿上交叉划出很细密的凹槽。将穿刺出的睾丸组织放在划有凹槽的小皿上，用适量G-IVF液（Vitro life, Sweden）培养液浸润。再用两个带针头的注射器，一个按住曲精小管，将曲精小管压在预先划好的小凹槽上，同时用另一个注射器的针头把取精小管划开，再把曲精小管里的内容物往外挤。再在显微镜下观察挤出的内容物中有无精子，若没有或者较少可以再次挤压或者打磨，直到在显微镜下看到足量精子。使用悬液制作ICSI操作皿，放入37 ℃、6.5% CO2培养箱内孵育,待行ICSI。 1.5 受精、胚胎评估和胚胎移植 按照Palermoetal的方法选择MII卵子行ICSI，16～18 h观察受精，正常受精可观察到双原核和两个清晰或碎裂的极体，随后每24小时观察并记录胚胎分裂情况，取卵后3 d选择优质胚胎移植。若年龄30 IU/L则为生化妊娠；再于移植后30 d，阴道B超检查显示妊娠囊及心管搏动为临床妊娠。 1.6 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对数据进行统计学分析，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验。 2 结果 PESA组和TESA组ICSI治疗结局见表1。 表1 TESA与PESA间ICSI临床结局的比较 3 讨论 男性不育占不育因素的40%，其中梗阻性无精子症是常见原因之一。梗阻性无精子症的病因主要包括：输精管先天缺如、输精管道的炎症、硬化和医源性梗阻比如双侧腹股沟斜疝手术等等。阻塞性无精子症患者，即使接受了重建输精管道的手术，仍然有70%以上的患者不能获得妊娠［2］。然而，自从卵母细胞单精子显微注射（ICSI）问世后［3］，这些患者还可以通过该项技术获得自己的后代。PESA取精易操作，创伤小，时间短，并发症少，对患者影响小，可重复再次取精。如数次穿刺抽吸不到精子可改用TESA抽吸睾丸曲细精管，从中分离寻找精子。欧建平等［4］研究表明无精子症患者行反复附睾或睾丸取精是安全和可接受的。通过PESA或TESE获得附睾或睾丸精子的方法结合ICSI技术治疗梗阻性无精子症是