射干麻黄糖浆对豚鼠支气管哮喘实验探究.docVIP

射干麻黄糖浆对豚鼠支气管哮喘实验探究陈若冰　邱兰萍　张学仕 摘　要：目的：从内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)的角度说明射干麻黄糖浆治疗豚鼠支气管哮喘的机理。方法：选用荷兰白种豚鼠，随机分成4组，采用Barnes及吕宝璋方法进行哮喘遣模，观察各组豚鼠血浆中ET,TXB2、6－keto－PGF1α含量的变化。结果：氨茶碱组和射干麻黄糖浆组动物血浆中ET、TXB2的含量低于模型组，6－keto－PGF1α的含量高于模型组。结论：射干麻黄糖浆是治疗哮喘的有效方剂，其作用机理之一是提高血浆中ET,TXB2的含量和降低血浆中6－keto－PGF1α的含量。 关键词：哮喘；射干麻黄糖浆；内皮素(ET)；血栓素B2(TXB2)；6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α) 中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1480－03 在我国，支气管哮喘的患病率为1％－4％，并呈逐年增加的趋势，其已成为严重威胁公众健康的一种主要慢性疾病。 射干麻黄糖浆是以射干麻黄汤加上地龙、甘草等药炮制而成，以《金匮要略》原文“咳而上气，喉中水鸡声，射干麻黄汤主之”为理论基础，用以指导治疗发作期哮喘。本实验旨在通过对哮喘豚鼠血浆中ET、TXB2、6－keto－PGF1α含量的研究，探讨射干麻黄糖浆治疗哮喘的作用机理。 1　材料与方法 1．1 实验材料 1．1．1　动物荷兰白种豚鼠加只，雄性，体重(350±50)g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。实验动物合格证书编号：辽实动质字[2000]019号。 1．1．2　疗物中药：射干麻黄糖浆，药用：射干15g，麻黄8g，救冬花15g，细辛3g，紫菀15g，地龙15g，五味子15g，半夏15g，生姜15g，甘草15g，大枣6枚等12味。共4剂，常规煎煮成550mL的汤药(即4mL汤药中含有4g生药)，再放入60％的糖和微量防腐剂制成射干麻黄糖浆。 西药：氨茶碱片，赤峰制药(集团)蒙欣药业有限公司，内卫药准字(1996)第000206，制成氨茶碱溶液，其含量为4mL溶液含0.015g氨茶碱。 1．1．3　试剂 蛋白片，上海化学试剂分装厂，GB2756－81，批号92－11－28，购于沈阳医药股份有限公司。分别在使用前配成10％和1％的蛋白溶液。 1．1．4　试剂盒内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)放免试剂盒，100规格，购于北京北方生物技术研究所。 1．1．5　仪器设备雾化器DS－671，5mL针管100个，低温高速离心机MR1822 1400r/min souan法国 1．2实验方法 1．2．1 实验动物分组和饲养条件将实验动物随机分为4组：空白对照组、模型组、氨茶碱组、射干麻黄糖浆组。每组10只，分笼饲养，室内安静，自然光照，通风良好，室温20－26℃，湿度45％－65％，饲料为全价颗粒大鼠饲料和每日于市场购买的新鲜胡萝卜、大头菜，垫料为干草，每2－3天换1次垫料并进行室内消毒。 1．2．2　造模方法及给药，豚鼠适应性饲养3天，熟悉环境后，进行造模，除空白对照组外，其余3组均腹部注射新鲜配置的10％蛋白溶液1mL，空白对照组腹部注射1mL生理盐水，14天后，除空白对照组通过雾化器用生理盐水进行喷雾激发无反应外，其余3组均通过雾化器用新鲜配置的1％蛋白溶液进行喷雾激发，直到出现烦躁、咳嗽、腹肌抽动、鼻翼煽动等症状，每日1次，于激发前灌胃，空白对照组和模型组给予4mL生理盐水，射干麻黄糖浆组给予4mL射干麻黄糖浆(含4g生药)，氨茶碱组给予4mL氨茶碱溶液(含0.015g氨茶碱)，并记录各组喷雾激发到出现症状的时间。 1．3　取材和指标检测 配制新鲜的20％氨基甲酸乙酯溶液(即乌拉坦)，腹腔注射进行麻醉，剖开胸腔，用一次性5mL注射器心脏穿刺取静脉血2mL注入内含10％EDTA二钠3μL和抑肽酶40μL的洁净试管中，混匀，4℃，3000r/min离心10min，分离血浆，于－70℃下保存，待测ET。取一次性5mL空针吸取消炎痛－EDTANa2液约0.1mL，快速静脉穿刺取血5mL。即刻在空针颠倒混匀，注入试管内，4℃，3500r/min离心15min，分离血浆，放-70℃下保存，待测TXB2和6－keto－PGF1α。检测方法为免疫平衡法。 1．4统计方法 采用SPSS.11软件进行方差分析。 2　结　果 哮喘激发后豚鼠皮毛没有激发前光滑、柔顺，食量减少；在4组中，模型组从激发开始到出现症状的时间比氨茶碱组和射干麻黄糖浆组短