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弥漫性大B细胞淋巴瘤中Ki-67-Bcl-2蛋白表达临床意义
弥漫性大B细胞淋巴瘤中Ki-67\Bcl-2蛋白表达临床意义【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2011)09-0010-02
【摘要】弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)生发中心组(GCB)和非生发中心组(non-GCB)的Ki-67、Bcl-2蛋白表达之间可能存在相关性,且这二者都被认为与细胞周期及增殖调控有关,提示二者在肿瘤的发展过程中可能有协同作用。?
【关键词】淋巴瘤;免疫组化;组织微阵列
DLBCL是非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)中最为常见的组织学类型,在欧美和日本占成人NHL的30%~40%[1]。DLBCL的形态学、免疫表型、遗传学和临床表现极具异质性。?
1 材料和方法?
1.1材料 选取彭泽县人民医院病理科DLBCL存档蜡块53例,经2位副主任医师重新阅片,明确诊断并排除可能由惰性淋巴瘤转化为DLBCL的病例。存档蜡块全部重新制作HE切片,参照2008年WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类标准,由两位副主任医师对其组织学和免疫表型进行回顾性分析并确诊。另选淋巴结反应性增生标本20例做对照组。?
1.2 方法?
1.2.1 DLBCL组织芯片的构建与制备: 1.组织芯片模块制做:将熔化石蜡(加入等量的蜂蜡)制作成2.5×2×0.5大小的空白蜡块,设计制作受体蜡块。2、组织芯片的设计和制备:将原蜡块放在45℃温箱中烘5-10min待蜡块变软,然后,先在显微镜下定位,避开出血坏死区,选取肿瘤组织丰富的区域,用穿刺针从组织块选定部位逐个取出组织芯,放入预先设计的阵列模块中,制成组织芯片。将制成的组织芯片面朝下放在铜板上,于55℃放置30min,轻压模块使组织柱在模块中排平。待冷却后放入72℃烤箱中,维持时间1小时,目的是使组织芯与受体蜡块充分融合。3、组织芯片蜡块采用连续切片,切片厚度约4μm,用多聚赖氨酸处理过的玻片捞片,置37℃电热恒温箱中烤片过夜,以备实验用。?
1.2.2 免疫组化结果判定: CD20、CD79a、CD3、 CD10、Bcl-6、MUM-l用来帮助判断肿瘤细胞及明确诊断并进行GCB和non-GCB分组;CD20、CD79a、CD3、CD10、Bcl-2着色部位位于细胞膜,如果有大于30%以上的细胞出现阳性着色记为阳性;Bcl-6、MUMl为胞核着色,如果有大于30%以上的细胞出现阳性着色记为阳性;Ki-67着色部位位于胞核,如果有大于50%以上的细胞出现阳性着色,确定为该蛋白阳性。?
1.3 统计处理: 免疫组化结果采用百分率比较采用X2检验,当样本例数较少时,采用Fisher确切概率检验;蛋白表达的相关性采用Spearman相关检验,采用SPSS13.0软件进行统计学处理,以P
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