急性单核细胞白血病病人外周血TCRVI];T细胞克隆性增殖特点.PDF

维普资讯 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2002，18(7)．! 二! · 765 · [文章编号] 1000—4718(2002)07一Cr765—05 急性单核细胞 白血病病人外周血 TCRVI]； T细胞克隆性增殖特点* 李扬秋 ， 杨力建 ， 陈少华 ， 郁 志 ， 曾慧兰 ， 许敏华 (暨南大学医学院 血液病研究所， 第一附属医院血液科 ，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：了解急性单核细胞白血病 (ANLL—M5亚型)病人 TCRVp亚家族 T细胞的分布及其克隆性。 方法 ：利用RT—PER分别扩增 9例M5病人外周血单个核细胞的TCRVp24个亚家族基因的 CDR3，了解病人各 Vp 亚家族的利用情况。阳性的PER产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度，了解 T细胞克隆性。 结果 ：9例病人仅存在 1—10个 VB亚家族 T细胞。基因扫描分析显示 ，8例病人外周血中的某些 VB亚家族出现寡 克隆性 T细胞，vp2寡克隆T细胞发现于6例病人中，2例分别存在 vp7或vp9克隆性T细胞，2例除 vp2外，还分 别出现Vp7或 Vp21的寡克隆T细胞。结论 ：结果提示 M5病人外周血 亚家族 T细胞的倾斜性分布特点，并存在 克隆性增殖 的T细胞 ，这可能是机体 T细胞受 白血病细胞相关抗原的刺激作用而 引起机体产生相应 的特异性免疫 反应 ，并 以Vp2的克隆性增殖 T细胞为主 ，提供 了明显的趋 向性 ，它可能与 M5细胞相关抗原有关 。 [关键词] 受体 ，抗原，T细胞； 基因； 白血病 [中图分类号] R733．7 [文献标识码] A T细胞受体(Tcellreceptor，T℃R)重排过程中，形 4例 ，年龄 28—69岁，平均年龄51．4岁，收集全部病 成一高度 可变区 (VNDNJ区)，称为互补决定 区 3 人 (初发治疗)的外周血 。T细胞株 Molt一4，Jurkat和 (complementaritydeterminingregion3，CDR3)，不同重排 K37作为单克隆对照 。10例正常人作为多克隆对照。 (不同克隆)时，其 CDR3长度不同，故利用这一特点， B细胞株 Raji和 Namalwa作为阴性对照。外周血单 通过检测 T℃RVB24个亚家族的 CDR3长度 ，可 以了 个核细胞 的分离按常规方法进行 。 解机体 T细胞不 同亚家族 的分布及其克隆性 ，这是 2 RNA提取和 合成 近年法 国等 国家新开展 的检测 T细胞克隆性 的方 RNA提取应用 RNAzol试剂盒 (Gibco，BRL)并应 法_l’2J。本研究利用 RT—PCR和基 因扫描方法分析 用随机引物和反转录酶试剂盒 (SuperscriptII，Gibco， 急性单核细胞白血病病人外周血单个核细胞的TCR BfuL)反转录合成 cDNA第一链。均按常规方法进 24个亚家族基因，了解病人各 亚家族 T细胞 行。 的表达及其克隆性情况。 3 引物 材 料 和 方 法 用于非标记 PCR的 24个 VI3引物和一 CI3引物 ， 用于 runoffreaction的5’端荧光素标记的C8一fam引 1 样本 物和用于序列分析的5’端生物素标记 的CI3一bio引 经细胞形态学和组织化学按 FAB诊断标准确诊 物均由德 国柏林 TIBMOLBIOL公司合成 [I4]。 的急性单核细胞 白血病 即急性非淋 巴细胞 白血病