脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定.docVIP

　　脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定 ：邓瑞云，陈永刚，周改莲，区计明，林励，成陈波，李明 【摘要】 　　【目的】建立脑忆源胶囊中总黄酮和淫羊藿苷含量的测定方法。【方法】采用《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中规定的方法，以芦丁为对照品，采用紫外—可见分光光度法测定总黄酮含量，高效液相色谱（HPLC）法测定胶囊中淫羊藿苷含量，色谱柱:luna Cl8（2） 100R（150mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈—水（体积比为30∶70），流速：1.0mL/min，检测波长：270nm。【结果】芦丁在0～24.75μg /mL范围内呈良好的线性关系，r=0.9990，平均加样回收率为102.29％，sR为1.34％（N＝5）；淫羊藿苷含量在6.9×10-2～4.83×10-1μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系，r=0.9999，平均回收率为95.39％，sR为2.5%（N=5）。【结论】本研究所建立的方法能够准确测定脑忆源胶囊中黄酮类成分的含量。 【关键词】 脑忆源胶囊/化学；总黄酮/分析；淫羊藿苷/分析；色谱法，高压液相；分光光度法，紫外线 　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of total flavonoids and icariine in Naoyiyuan Capsules. MethodsATOGRAPHY，HIGH PRESSURE LIQUID； 　　脑忆源胶囊是由补肾中药巴戟天、淫羊藿为主，辅以枸杞子、山药组成的保健食品，用于辅助改善记忆、缓解体力疲劳等症状。 现代 研究已证实该方中单味药材含有丰富的黄酮类和糖类物质［1］，具有增加脑血流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，抗衰老等功效［2］，可用于改善记忆力、缓解体力疲劳及抗衰老等［3-4］。由于糖类物质无紫外吸收［5］，故本实验选择总黄酮和淫羊藿苷作为脑忆源胶囊的测定指标，建立其含量测定方法。现报道如下。 　 　1仪器与试药 　　8453E型紫外可见分光光度计（美国 Agilent公司），天美液相色谱仪（LC2030型紫外检测器、L2200型进样器、LC2130型泵），ELO2116729型紫外分光光度计，BS110S 电子 天平（Sartorius 公司）。脑忆源胶囊样品为自制（批号20080819，芦丁对照品（购自 中国 药品生物制品检定所，批号：100080200306），淫羊藿苷对照品（购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：0737200111），聚酰胺粉（柱层析用，60~80目，浙江台州市路桥四甲生化塑料厂），乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，甲醇、乙醇、苯均为分析纯。 　 　2方法与结果 　　2.1总黄酮的含量测定 　　2.1.1溶液的制备［6］ 　　2.1.1.1芦丁对照品溶液的配制称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解制成50μg/mL的芦丁溶液。 　　2.1.1.2供试品溶液的制备取脑忆源胶囊3粒（批号平均装量0.45g/粒），精密称取内容物粉末1.0g，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声（500in；放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱；先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，收集洗脱液约80mL，水浴浓缩，定容至25mL；此液于波长360nm处测定吸收值，代入回归方程， 计算 试样中总黄酮含量。 　　2.1.2标准曲线的制备吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm处比色。以对照品溶液浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，得直线回归方程为Y=0.027 3X-0.010 2，R=0.999 0，线性范围为0～24.75μg/mL。 　　2.1.3精密度试验取芦丁对照品溶液（14.85μg/mL），连续测定5次，结果其吸光度值的sR为0.46%，表明精密度良好。 　　2.1.4重复性试验精密称取供试品1.0g（批号，平行5份，制备供试品溶液，按2.1.2项下方法测定其吸光度值，结果其吸光度值的sR为 0.29%，表明该方法的重复性较好。 　　2.1.5稳定性试验取同一供试品溶液（批号，分别在0、15、30、45、60min时测其吸收度，结果其sR为0.05%，说明供试品溶液在60min内稳定。 　　2.1.6加样回收率试验精密称取已测含量的胶囊内容物（批号，加入芦丁对照品，按2.1.1.2项下制备方法进行试验，其平均回收率为102.29%，sR为1.3