锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX-2表达的影响.docVIP

　　锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX?2表达的影响 【摘要】 目的：研究锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX?2表达的影响,以此探讨锌和维生素E对糖尿病心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只) ,各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/ L、pH = 4.4 的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ 溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度gt; 16.6mmol/L ,饮水量gt; 40ml/d ,尿糖强阳性( + + + ～ + + + + )的大鼠作为糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为:糖尿病对照组、糖尿病补锌组、糖尿病补VE组和糖尿病补Zn和VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学的实验,观察各组心肌组织中COX?2的表达水平, 利用HPIAS?2000图像分析系统测定COX?2在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。 结果：正常对照组心肌细胞内COX?2呈阴性表达, 糖尿病对照组心肌细胞内COX?2呈阳性表达；糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内COX?2呈弱阳性表达；糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内COX?2呈阴性表达。图像分析结果显示，糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间COX?2的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(Plt;0.05)；糖尿病补Zn+VE组与正常组之间COX?2的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(Pgt;0 05)。 结论： Zn和VE联合使用可降低糖尿病大鼠心肌组织中COX?2的活性,对糖尿病大鼠心肌细胞起了重要的保护作用。 【关键词】 锌 维生素E 糖尿病 心肌 糖尿病( diabetes mellitus ,DM) 是一类由于胰岛素绝对或相对缺乏或胰岛素生物活性降低,或者以上两者共同引起之体内代谢失调及高血糖状态［1］。临床上主要分为2 型,即1 型糖尿病和2 型糖尿病,世界各国糖尿病患病率均上升,其中90 %为2 型糖尿病。 　　糖尿病性心肌病是糖尿病的慢性并发症之一,是糖尿病发病过程中特异性的心肌受损和心脏功能改变,糖尿病性心肌病的出现可以不伴有缺血性病变、血管病变及高血压等并发症。目前糖尿病性心肌病的确切病因还不清楚,但目前认为糖尿病性心肌病的发生主要与心肌能量代谢紊乱、Ca2+ 超载、血管动脉硬化、氧化应激、高血压及高血糖导致的心肌细胞凋亡等有关。糖尿病时,高血糖引起的氧化应激参与了心肌细胞的损伤。糖尿病在病理组织形态上主要是由于胰岛损伤,胰岛素绝对或相对缺乏所引起［2］ 。近年来,国内外许多学者经过临床和流行病学调查,以及周密设计的基础研究和实验研究,虽然对糖尿病的病因有了较多的认识,但对原发性糖尿病的病因仍然不清楚。因此对糖尿病的治疗也就成了目前人们所关注的焦点。 　　环氧化酶又称为前列腺素内过氧化合成酶,前列腺素H合成酶,是催化花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶。COX?2属于诱导型,静息时不表达,但可以在细胞因子、激素、致癌物质等多种诱导因子的刺激下快速表达,参与多种病理生理过程［3］。近年来研究表明,COX?2不仅与病理生理过程有关,与肿瘤的发生发展也有密切的联系。COX?2的高表达与糖尿病并发症的发生密切相关。 　　Zn 作为机体必需的微量营养元素,是体内200多种蛋白酶的金属配基,其水平的提高势必有利于这些酶活性的提高［4］。Zn 对细胞保护作用的途径之一,是基于控制过氧化作用［5］。VE 作为天然抗氧化成分,对维持体内自由基平衡,促进机体正常发育,保护细胞膜稳定具有重要作用。锌和维生素E是抗氧化剂并具有细胞保护作用。本研究应用免疫组织化学方法观察了锌和维生素E联合应用对高血糖引起的心肌细胞内COX?2的表达,旨在探讨两者对糖尿病大鼠氧化应激时心肌结构的影响及对心肌细胞的保护作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 实验动物为昆明种SD大鼠50只,雄性,体重180～200g,由武汉大学医学院实验动物中心提供,适应饲养1g/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/ L、pH = 4.4 的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ 溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度gt; 16.6mmol/ L ,饮水量gt; 40 ml/ d ,尿糖强阳性( + + + ～ + + + + )的大鼠作为糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为糖尿病对照