高效液相—质谱联用法对盐酸关附甲素在大鼠尿中代谢物的研究.pdfVIP

维普资讯 约学学报 A( PlIarmaceutiea5inJea2002，37(4)：283 287 高效液相 ．质谱联用法对盐酸关 附甲素在大 鼠尿 中代谢物 的研究 阿基业 ，王广基 ．枷 晓泉 ，江丹云 ，刘静涵 中国药科大学 1 药物 代谢研究 巾心 ．2 植物化学教研事 ． 苏 南京 210009 摘要 ：目的 研究盐酸关附 素在大 鼠屎 中的代 对产物 方法 大 鼠 v盐酸羌 附L}素『后收集尿 ，州 离散液 ． 质谱联州方法测定 。通过与标准化合物 的色谱保 留时 日]、分于离 峰 ，碎 片离子峰对 照从 鉴定 1卡H代谢物 通过 用葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解 鉴 定其水解产物 (苷兀 j从 而确 定 II相 结合物 结果 大 鼠屎 中发现 I 代谢物 关 附 醇胺干¨关附千素 ；尿终过葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后 ．产 j关附 甲素和关附T紊 。结论 盐酸关附_1l豢 人 鼠体 内可 以转化为关附壬 素、关 附醇胜 关附 甲素葡糖 醛酸和硫醣结 合物 、羌 附千索葡糖阱酸和硫醢结 什物 经 过 糊 转化 ，代谢产物 的极性增加 ，药 效下 降 关键词 ：盐酸关附 甲素 ；l相代谢物 ：II相结台物 ；高技液相 质谱法 (LC／MS) 中图分类 号 ：R917 lO1 文献标识码 ：A 文章编 号 ：o513—4870(2(102)04 0283 05 关附 甲素 (guanfubaseA，GFA)是从 东北产 关 白 二酸单 内酯和葡糖醛酸酶 (Sigma公司)i乙腈为色谱 附子块根 中提 取 的二萜类 生物碱 ．为 一抗 心律 失 纯 ；冰乙酸 _二己胺 、己酸 己酯 、乙醚及 其他 试剂为分 常新药 ：药理研究表 明 ．关 附 甲素具有广谱抗 心律 析纯 ，使用前经过重蒸处理 。 失常作用 ，对 鸟头碱 引起 的大 鼠室性 b律失 常和 仪器 美 国惠普 公 司 1100 液丰lH／质谱联 系 电刺激引起家兔 b室纤颤都具有保护作用 ，并能显 统 ．包括双高压泵 、真空脱气机 、自动进样装置 、柱温 著减低 CaCI，引起 的大 鼠室颤发生率 和死亡率 ，对 箱和 惠普工作 站 抗乌头碱诱发 的大 鼠心律失常 ．对哇 巴因引起 的狗 动物 Spraque—Dawley0』(鼠，l，海实验动物养 室性 b动过速也有治疗作用 ．． 殖 中心 GFA结构 中无共轭 双键 ，仅 在 紫外末端 有吸收 ， 给药方法 取体重 l80～220g人 鼠，饲养 I周 通常紫外检测灵敏度较低 。，GC—ECD 的分析方法 置代 谢笼 中，禁食 过夜 ，收集空 白尿样后 ，乙醚浅麻 ， 需要进行衍生化 ，不利于代谢物研究一而 LC／MS不 按 30ing·kg’剂量 尾 iv缔 y-(FA一 但灵敏度高 ，而且从 色谱 图中可 了解分子量信 息 ， 尿样 的收集 分 别 于绐 药 前 收集 空 白尿 样 ，给 因此有助 于代谢 产 物 的鉴定 。为 了弄清 GFA在 体 药后 2，4，6，8，l0，12和 I5h收集尿样 ．一10 ：球箱 内的代谢途径和代谢产物 ，本文用高效液相一质谱法 中冷冻 备用 对大 鼠尾 ivGFA后 收集 的尿样进 行 了代 谢 产 物 的 样 品提 取方 法 取 大 鼠各 时 州混 合尿 样 0．5 研 究 mL，置 10mI离 心管 内，加 八碳 酸氢钠，碳 酸钠饱 干u