穴位埋线治疗大鼠非酒精性脂肪肝实验探究.docVIP

穴位埋线治疗大鼠非酒精性脂肪肝实验探究（浙江省中医院，浙江 杭州 310006） 摘 要：目的：观察穴位埋线对非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法：采用高脂饮食喂养12周建立非酒精性脂肪肝大鼠模型后以中脘、气海、天枢（双）穴位埋线治疗8周，常规HE染色检测肝组织的脂肪变和炎症程度，生化法检测血清和肝组织甘油三酯、胆固醇及血清ALT、AST的变化，ELISA法检测血清TNF-α含量。结果：模型组大鼠肝组织可见弥漫性肝细胞脂肪变和不同程度炎细胞浸润，血清及肝组织脂质代谢紊乱，血清ALT、AST水平及TNF-α水平较正常组明显升高，应用穴位埋线治疗后，大鼠肝组织脂肪变和炎症程度明显减轻，肝组织TG、CHOL含量明显下降，血清ALT、AST水平及TNF-α含量明显降低。结论: 穴位埋线对非酒精性脂肪肝有较好的治疗作用，其作用机制可能与其调节脂质代谢、降低血清TNF-α水平有关。 关键词：非酒精性脂肪肝；穴位埋线；中脘；气海；天枢 中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717（2011）03-0543-02 收稿日期：2010-10-09 基金项目：浙江省中医药科技计划资助项目（2007CB146） 作者简介：龚秀杭（1957-），女，浙江杭州人，副主任中医师，研究方向：针刺疗法治疗消化系统疾病、妇科疾病。 近年来，随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，非酒精性脂肪肝的发病率不断上升，发病年龄趋于低龄化，并且部分患者可进展到终末期肝病，因而已成为人们普遍关注的一个公共健康问题。本实验选择经济方便的穴位埋线作为治疗手段，观察其对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝的影响，为临床防治提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 实验动物 SD大鼠24只，雄性，清洁级，体重190～210g，由上海西普尔――必凯实验动物中心提供。 1.2 主要试剂 胆固醇（批号061108）为上海伯奥生物科技有限公司，3号胆盐（批为杭州微生物试剂有限公司产品， ALT（批号6653/31033/6）、AST（批号6730/31595/1）、TG（批号571/019/1）、CHOL（批号130/017/1）、HDL（批号6660/31043/1）为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品，HDL（批号0060428-2）为上海复星长征医学科学有限公司，TNF-αELISA试剂盒（批号QRCT300333）为美国ADL公司产品。 1.3 NASH模型的建立 大鼠每天予以高脂饲料（82%普通标准饲料＋10%猪油＋2%胆固醇＋1%胆盐＋5%蛋黄粉）喂养，连续12周建立非酒精性脂肪性肝病模型大鼠。 1.4 分组及处理 24只大鼠随机分为正常组、模型组及穴位埋线组，每组8只，正常组每天予普通饲料喂养20周；模型组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改这普通饲料喂养；穴位埋线组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改为普通饲料喂养，同时从第13周第1天起采用穴位埋线方法进行治疗，穴位选用中脘、气海、天枢（双）［1］，用消毒镊子将0.5cm生物可降线置于一次性埋线器具［京药监械（准）字2005第2270643号］套管内，消毒皮肤，快速刺入特定穴位皮下，14天后重复，共4次，疗程8周。实验第20周未禁食不禁水16h，次日空腹取血及肝组织进行下列检测。 1.5 检测指标 肝组织病理学检查：常规HE染色，光镜下观察肝脏细胞脂肪变性及炎症浸润程度，非酒精性脂肪性肝病的病理组织学诊断参考2006年2月中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组修订的“非酒精性脂肪性肝病诊疗指南”［5］，其中脂肪变程度分4度：F0（-）、F1（+）、F2（2+）、F3（3+）、F4（4+）；炎症程度分为3级：G0（-）、G1（+）、G2（2+）、G3（3+）。血清ALT、AST、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C采用全自动生化仪检测；肝组织匀浆TG采用异丙醇提取、氧化铝吸附磷脂和乙酰丙酮显色法测定，CHOL采用异丙醇提取，高铁、硫酸显色法测定。血清TNF-α采用ELISA法测定。 1.6 统计学方法 采用SPSS 12.0 for Windows软件包统计，计量资料采用单因素方差分析和多重比较，等级资料采用χ2检验。 2 结 果 2.1 穴位埋线对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏组织学影响 正常组大鼠肝组织光镜下未见明显异常；模型组大鼠肝组织仍可见中到重度弥漫性肝细胞脂肪变，伴小叶内炎症及汇管区有炎细胞浸润，以小叶内炎症明显，个别有碎屑样坏死；穴位埋线组大鼠肝组织脂肪变以中度为主，肝组织的炎症程度较模型组显著降低（P0.05）；见表3。模型组、穴位埋线组大鼠肝匀浆TG、CHOL含量较