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部分重金属及酚类混合物对淡水发光菌毒性探究
部分重金属及酚类混合物对淡水发光菌毒性探究随着工业生产的不断发展,重金属对人类赖以生存的水源污染日益严重。在美国环保署(EPA)公布的水环境中存在的129种优先污染物中,重金属类化合物就占12种。另一方面,含酚废水危害大、污染范围广。在许多工业领域诸如冶金、机械制造、玻璃、石油化工、化学有机合成工业、塑料、医药、农药、油漆等工业排出的废水中均含有酚(陈延君等)。人们对重金属和酚的毒性展开了广泛的研究,然而现实环境中,生物往往更多地、也更普遍地暴露在多种组分污染物存在的复杂混合体系中,因此,研究两者的联合毒性有着非常重要的意义。
1材料与方法
1.1 菌种及主要仪器、试剂
青海弧菌Q67(Vibrio-qinghaiensis sp.─Q67),华东师范大学提供,培养基配方及培养方法参见文献(莫凌云,等,2006)。VeritasTM微板光度计(美国TurnerBiosystems公司);LS-B50L型立式压力蒸汽灭菌器(上海医用核子仪器厂);Pipetman型移液器(P型移液器,P20,2μl~20μl;P100,20μl~100μl;PUM12×300,20μl~300μl)(法国吉尔森公司);LRH-150Z型恒温振荡培养箱(广东医疗器械厂)。CdCl2·2.5H2O、CoSO4·5H2O、Cu(NO3)2·3H2O、Fe(NO3)3·3H2O、ZnSO4·7H2O、Ni(NO3)2·6H2O,苯酚,邻甲基苯酚,间甲基苯酚,邻硝基苯酚,间硝基苯酚(以上化合物均为分析纯)。以上化合物均以0.05mol·l-1的硝酸钠溶液为溶剂,配制待测溶液后,保存于4℃冰箱中待用。
1.2 实验方法
1.2.1 单个毒物对发光菌的毒性
单个毒物及其混合物对发光菌发光抑制率的测定方法参见文献(邓辅财,等,2007)。发光抑制率的计算方法参照文献(莫凌云,等,2006)。实验剂量-效应数据的非线性模拟以及应用剂量加和(DA)与独立作用(IA)原理预测混合污染物剂量-效应曲线(DRC)的原理均按文献方法(葛会林,等,2006)进行。
1.2.2 重金属及酚类化合物混合物对发光菌的联合毒性
混合物的设计采用等效应浓度比法设计了3个等效应浓度(EC50、EC10和EC5)比混合物(分别记为EE-50、EE-10、EE-05)。将各混合物视为总浓度为各单个毒物浓度之和的特殊“单个”物质按照1.2.1节的方法测定其对发光菌的毒性。
2结果与分析
2.1 单个毒物对Q67的毒性
分别利用Logit或Weibull函数(葛会林,等,2006)对实验测定的单个毒物数据进行拟合,得出6种重金属化合物的半数效应浓度EC50大小顺序为:Cd2+Zn2+Cu2+Fe3+Ni2+。若以EC50的大小作为毒性评价标准,则这6种重金属化合物的毒性顺序为:Cd2+Zn2+Cu2+Fe3+Ni2+。同理,5种酚类化合物的毒性大小顺序为间甲基苯酚邻甲基苯酚间硝基苯酚≈邻硝基苯酚苯酚。
2.2 6种金属与5种酚类等EC混合物对Q67的毒性
3个等效应浓度混合物的总剂量-效应预测曲线及相应混合物的实验总剂量-效应曲线可见图1。从图1我们还发现,6种金属化合物与5种酚类化合物等EC50混合的混合物的实验点与DA/IA黏合在了一起,即EE-50的毒性用DA和IA均可以很好的预测,但具体是DA还是IA却并不明确。我们对此的研究发现,原来的6种金属化合物中的各个β大部分都>2.3或者近于2.3,故其DA与IA线可以较好的分离,但加入的酚类化合物却大部分β都近于2.3或小于2.3,尤其是P2远小于2.3(仅为1.74),故将两条线拉近了距离,从而导致预测的效果不是很好。由此可以推测,运用DA/IA进行混合物研究时,单个毒物的β值为2.3可能是一个分水岭。为了取得较好的DA/IA预测效果,建议将β值大于和小于2.3的单个毒物分别混合来进行。此外,等EC5混合的EE-05混合物的剂量-效应关系可以用IA模型进行有效的预测;而等EC10混合的EE-10混合物的剂量-效应关系的实验拟合点则处与DA和IA线的上方,从而呈现出协同作用。此二者的实验点用DA/IA预测的结果及效果与EE-50有所不同,究其原因,可能是由于浓度配比的改变,使得其中某种或某几种组分所占百分比例有所变化缩致。
参考文献
[1] 陈延君,赵勇胜,景体凇,等.镉和酚对多刺裸腹蚤的联合毒性试验[J].重庆环境科学,2003,25(10):10~11.
[2] 邓辅财,刘树深,刘海玲,等.部分重金属化合物对淡水发光菌的毒性研究[J].生态毒理学报,2007,4:402~408.
[3] 葛会林,刘树深,刘芳.多组分苯胺类混合物对发光
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