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黄芪多糖中脱蛋白方法探究摘 要：目的：为了筛选最佳的黄芪多糖的脱蛋白效果。方法：比较sevage法，蛋白酶法，乙酸铅法和732树脂法脱除黄芪多糖中的蛋白质的效果。结果：蛋白酶法和732树脂法都可以较好的除去黄芪多糖中的蛋白质。尤其以732树脂静态吸附效果为最佳，多糖得率达88.6%，蛋白质含量降低至0.91%。而且732树脂成本低，快速，吸附效果好，样品损失小，便于在黄芪多糖的制备中推广使用。结论：732树脂静态吸附法是最佳的黄芪多糖脱蛋白方法。 关键词：黄芪多糖；脱蛋白；732树脂 中图分类号：R282.710.2 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)03-0614-02 Study Methods for Removing Protein From the Astragalus Polysaccharides Extract GAO Mei-feng1，2，YU Ting-ting2 (1.Nanjing University of Chinese Medicine ，Nanjing 210029，Jiangshu，China； 2.School of Life Science and Technology，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，Jiangshu，China) Abstract：Different methods about removing protein from the Astragalus Polysaccharides(APS) extract was studied，such as Sevage ，Protease，lead acetate and 732 resin methods. The results indicated that the Protease and 732 resin were good removing-protein methods. Especially，the APS recovery could reach 88.6% and protein residual content was 0.91% through static adsorption by 732 resin. Furthermore 732 resin possesses many advantages such as economic，rapid，safe and minimum sample loss and so on. Therefore 732 resin was the best performance for removing protein from APS extract. Keywords：astragalus polysaccharides；removal of protein；732 resin 黄芪为豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus (Bge)Hsiao]或膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge]的干燥根，是一种常用的中药。性味甘、微温，归脾、肺经[1]。黄芪含有多糖、蛋白质、生物碱、氨基酸、黄酮类、苷类、微量元素等多种生物活性物质，其中黄芪多糖(Astragalus polysaccharides，APS)是黄芪主要生物活性成分。黄芪多糖具有增强机体的免疫功能，降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效[2]。 有报道黄芪多糖中蛋白质含量高于15%，因此去除黄芪多糖中的蛋白质是多糖精制过程中比较关键的一步，传统的脱蛋白方法有Sevage法、三氯醋酸法、蛋白酶法、透析法等，但是这些方法都存着一定问题，如有机溶剂用量大，多糖得率不高，蛋白去除不完全等问题。本实验选用了几种相对安全、操作方便的脱蛋白方法进行研究，并与传统的Sevage方法进行了比较。 1 材料与方法 1.1 原料与试剂 黄芪多糖粗品，自制；中性蛋白酶(7万U/g)，无锡酶制剂厂；三水合乙酸铅，广州化学试剂厂；732树脂，天津海光化工有限公司；无水乙醇，氯仿，正丁醇，95%乙醇均为分析纯。 FA2104电子天平，上海天平仪器厂；电热恒温水浴锅，上海跃进医疗仪器厂；德国BekmanH-II冷冻离心机；凝胶层析柱1cm×40cm；LGL型冷冻干燥机；752分光光度机，上海精密仪器有限公司。 1.2Sevage法除蛋白[3] 配制一定浓度的黄芪粗多糖溶液中，加入1/3体积的sevage试剂(氯仿∶正丁醇为4