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神经损伤与功能重建 ·2008年1月-第3卷·第1期 19
· 论 著 ·
H2 O2致PC1 2细胞凋亡与
细胞内1 4—3—3蛋白表达水平下调的关系
陈小武 ，苏庆杰 ，陈志斌 ，孙圣刚 ，乔娴。
1．海南医学院附属医院神经内科，海口570102；2．华中科技大学同济医学院附属协和医院神
经内科，武汉430022
【摘要】 目的：探讨用 Hz0z处理 PC12细胞制作 PD氧化应激细胞模型的最佳浓度与最适处理时间，以及
Hz0z致PC12细胞凋亡与 14—3—3蛋白表达水平的关系。方法：采用MTT法、荧光分光光度计、流式细胞术及免疫
印迹技术分别检测 PC12细胞活力、Caspase酶活性、细胞凋亡率以及 14—3—3蛋白表达量。结果：当H。0。浓度为
100 t~mol／L时Caspase活性最高；100／zmol／I H2O2处理PC12细胞24 h时细胞凋亡率最高；PC12细胞的凋亡率
与14-3—3蛋白表达的水平呈显著负相关。结论：100 t~mol／L和24 h分别为用 H20。制作PD氧化应激模型的最佳
浓度和处理时间，Hz0z致PC12细胞的凋亡与细胞内14—3—3蛋白表达水平下调有关。
【关键词】 H2O2；PC12细胞；14—3—3蛋白；凋亡
【中图分类号】 R741；R741．02 【文献标识码】 A 【文章编号】 1001—117X(2008)01—0019-03
Apoptosis of PCI2 Cells Induced by H2 02 is Correlated with Down-regulated Expression of 14-3-3 Protein CHEN Xi—
no-w“ ，SU Qing—Jie，CHEN Zhi—bin，SUN Sheng—gang，QIAO Xian． Department of Neurology。Affiliated
hospital of Hainan Medical College，Haikou 570102，China
[Abstract] Objective：To explore optimaI concentration and time-course of H2O2 treatment of PC12 ceils for
setting up an oxidative stress cell model of PD，and to study relationship between apoptosis of PC1 2 cells induced by
H2 O2 and expression level of 1 4—3—3 protein．Methods：MTT assay，fluorescent spectrophotometer，flow cytometric
analysis，and western blotting were employed to measure cell viability，caspase activity，apoptotic ratio，and expres—
sion level of 14—3—3 protein respectively．Results：Treating PC1 2 cells with 100~tmol／L for 24 hours yielded the
highest caspase activity and apoptotic ratio．A significantly negative correlation was found between expression level
of 14—3～3 protein and apoptotic ratio of PC1 2 cells induced by H2 O2．Conclusion：Incubation with 100“mol／L H2 O2
for 24 hours
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