17HE问题处理表.docVIP

问题 原因 解决方法 1.细胞核不新鲜，核“破碎”，出现空泡，或染色质图像不清晰。组织中所有细胞核染色质图像没有差异，一个细胞胞核中染色质染色没有变化。 a）固定不足，不完全。 i）延长组织固定的时间。 ii）固定时用磁力棒搅拌固定液，使样本盒在固定液中转动。 iii）更换固定液，并使各样本盒在固定时保持一定间距。 b)组织内的水分在脱水和透明时没被完全去除。 i）通过回顾处理工作表检查确认组织是否已经充分脱水和透明。 ii）确保组织在处理过程中所需试剂都准确、及时补给、轮换，以避免试剂耗竭。 c)玻片在处理或烘干时接触的温度过高。 i)确保组织不要暴露在过热的环境中，若需要不断升温，则尽量使其在限定时间内处于较低温度中。 ii)蜡缸中的石蜡对管道产生了辐射热，使脱水和透明时温度增高。可通过调整暴露时间来抵抗升高的温度。 iii)烤片前竖放切片，让玻片上的水彻底流掉。烤片时温度应尽可能低。 2.伊红着色差。 a)固定不充分。 i)在允许时间内延长固定的时间以确保组织得到充分固定。 ii) 固定时用磁力棒搅拌固定液，使样本盒在固定液中转动。 iii) 更换固定液，并使各样本盒在固定时保持一定间距。 b)存在不当操作。 i)通过规范每一个操作步骤来确保操作正确，组织内所有的水分应在脱水和透明时彻底去除。 c)对伊红的分化不足。 i)确保对伊红有良好的分化。最佳的伊红分化液为70%的乙醇和稍高梯度的乙醇；因此，在脱水系列中加入70%的乙醇或者延长切片在70%乙醇中浸泡的时间则可补救分化不足的问题。 ii)确保用于分化的70%乙醇有定时更换。 d)伊红溶液不在合适的pH范围内。 i)确保使用中的伊红溶液pH在4.0~4.5之间，更换伊红染料，配置新鲜的伊红染液。 ii)确保新鲜的伊红pH在适当范围内，若pH高于4.5，可加入醋酸调节。 iii)确保玻片在“返蓝”之后充分水洗，以免携带碱性溶液到伊红中。 3.核浆染色对比度差。 a)核着色过深。 i)通过减少切片在苏木素染液中的时间或延长在分化液中的时间来降低苏木素染色的强度。 ii)每天检测苏木素染液的pH值以维持其最适酸性（pH2.5），可用原先配置的酸来调节。 b)核着色相对胞浆过淡。 i)通过以下方法增加苏木素染色的强度： ●延长切片在苏木素染液中的时间 ●缩短切片在分化液中的时间 ii)染完苏木素后用于冲洗的水必须是中性的；酸性的水会充当分化液的角色，洗去苏木素。水的pH会被农业灌水或其他旧水管中的污物所影响。可通过在水管中安置离子过滤器或直接连接使用去离子水或蒸馏水来调控冲洗用水的pH。 c)胞浆着色相对核过深。 i) 通过以下方法减弱胞浆染色的强度： ●缩短染色时间 ●稀释伊红染液的浓度 ●延长在70%乙醇中的分化时间 ●有使用二氢四溴荧光素（焰红燃料）添加剂的科室，则应调节二氢四溴荧光素的浓度。 d) 胞浆着色相对核过浅。 i) 通过以下方法增加胞浆染色的强度： ●延长切片在伊红染液中的时间 ●缩短切片在70%乙醇中的分化时间 ●确保伊红染液的pH在4.0~4.5之间，并视情况适时调整 ●调整伊红染液的配备，添加如二氢四溴荧光素之类的添加剂 4.胞浆染色过深；胞浆着色过强以至于无法区分出胶原，平滑肌和红细胞。 a)切片在伊红染液中浸泡的时间过长。 i)缩短切片在伊红染液中的时间。 b)切片在伊红染色后得不到充分的分化。 i) 延长切片在70%脱水乙醇中的分化时间。 c)水溶性伊红对切片的染色较醇溶性伊红深。 i)选择在用于脱水的梯度酒精中易于分化的醇溶性伊红。 d)用于伊红染色后分化的酒精作用不好。 i)将第一缸乙醇的浓度从100%换为95%，或从95%换为70%。 e)伊红溶液过浓，特别是已有二氢四溴荧光素存在的情况下。 i)若溶液中有二氢四溴荧光素，应降低伊红溶液的浓度，或换为只有伊红试剂的溶液。 f)异丙基乙醇被用作脱水酒精；异丙基乙醇对伊红的分化作用与乙基乙醇不同。 i)更换所用乙醇的种类。 ii)调整在异丙基乙醇中的浸泡时间。 5. 胞浆染色过浅；胞浆着色过淡以至于无法区分出胶原，平滑肌和红细胞 a)伊红染料已经耗竭。 i)更换新的伊红染液。 b)伊红染液已经过期。 i)更换仍在使用期中的新鲜伊红。 ii)轮换使用后备商品以确保最先前的批号先使用。 iii)按一定日期内伊红的使用量来选用装伊红染液的容器。 c) 切片在伊红染液中浸泡的时间过短。 i) 延长切片在伊红染液中浸泡的时间。 d)伊红染液的pH大于4.5。 i)检测伊红染液的pH值，其值应于4.0~4.5之间。若有需要可用浓缩乙酸来调节其pH值。 e)伊红染液浓度过低。 i)调整伊红的浓度