第二抗体对免疫组化染色影响.pdf

中文摘要 公司第二抗体与两种自制二抗差异均有统计学意义 (P0．01)。 结论：1．不同公司第二抗休免疫组化阳性结果存在差 异，说明不同公司生产的第二抗体是影响免疫组化染色的因 素。第二抗体的浓度、亲和性、特异性的不同均可造成不同 公司第二抗体质量的差别。 2．为了排除试剂浓度的影响，我们选取了两种亚类的 单克隆抗体作实验。对于同一标本，不同亚类单克隆抗体免 疫组化染色的阳性强度问及附陡率间的比值，不同公司第二 抗体的差异有统计学意义。说明染色差异不仅仅是浓度差异 造成的。 3．抗小鼠IgG的第二抗体可以分为两大部分，针对小 鼠IgG种特异性抗原决定簇的抗体和针对小鼠IgG亚类 (型)特异性抗原决定簇的抗体。两者及后者各组分的比例 和亲和性会直接影响第二抗体的质量。现在的第二抗体制备 方法多是由血清IgG作为免疫原，而血清IgG是多种亚类 (型)IgG的混合物且组分间比例不稳定，制备出来的第二 抗体质量就会不稳定。 4．我们由IgGl、IgG2b作为免疫原分别制备了第二抗 体做免疫组化染色并与Zymed公司第二抗体染色比较，染 色结果有显著差异。这说明第二抗体内针对小鼠IgG亚类 (型)特异性抗原决定簇的抗体确实会影响第二抗体的质 量。可以由各种亚类(型)的单克隆抗体分别制备相应的第 二抗体并混合，提高第二抗体的质量。 关键词：免疫组化；第二抗体；单克隆抗体；图像分析； 中文摘要 抗体制备 英文摘要 of on Theeffect secondaryantibody ABSTRACT isacommonusedlabeled objective：IHC immunoassay theclinical of workand intheresearch practice technique medicine has asthe easily today．Itmanyadvantages，such observed of result，etc．Because conveniently operatedsteps，the a doesn’thave factorsIHC good influencing many resultisn’t in its satisfying．To practice，SO reproducibility a to IHC madelotof stabilizethe result，scientists experime