第8章_真核基因表达的调控.pptVIP

螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix) （1）膜受体(membrane receptor)：存在于细胞质膜上的受体，根据其结构和转换信号的方式又分为三大类：离子通道受体，G蛋白偶联受体和跨膜蛋白激酶受体。 G蛋白的活性型和非活性型的互变 G蛋白(guanylate binding protein): 是一类与GTP或GDP相结合、位于细胞膜胞浆面的外周蛋白，由?、?、? 三个亚基组成。有两种构象,即非活化型和活化型。 高度可变区：位于N端，具有转录活性 DNA结合区：含有锌指结构，与特定的DNA序列---激素应答元件（hormone-responsive element,HRE）相结合。 激素结合区：位于C端，结合激素、热休克蛋白，使受体二聚化，激活转录 （2）胞内受体 配体：类固醇激素、甲状腺素等 受体功能：多为反式作用因子，当与相应配体结合后，能与DNA的顺式作用元件结合，调节基因转录。 4.4.2 信号传导途径 关于蛋白激酶与蛋白质磷酸化 蛋白磷酸化是机体调节的重要方式之一。通过两种酶的催化来实现：蛋白激酶使底物蛋白磷酸化；而蛋白磷酸酯酶则催化去磷酸化反应。蛋白磷酸化和去磷酸化成为机体中普遍存在的一种调节机理。在跨膜信息传递机理中，蛋白磷酸化的作用尤其重要。 根据蛋白磷酸化的部位，可将蛋白激酶分为2类，一类对Ser或Thr残基专一，统称为Spk（丝氨酸蛋白激酶），是第二信使的主要靶蛋白；另一类对Tyr残基专一，称Tpk（酪氨酸蛋白激酶）。 4.4.3 真核基因表达调控模式（举例） A激酶（PKA）：依赖于cAMP的蛋白激酶 （1）蛋白质磷酸化与信号传导和基因表达 cAMP调控的A激酶活性 cAMP活化糖原磷酸化酶示意图 不同细胞对cAMP信号途径的反应速度不同。肌肉细胞在1秒钟之内即可启动糖原降解为葡糖1-磷酸，从而抑制糖原的合成。 cAMP信号与基因表达 该信号途径涉及的反应链可表示为： 激素→G蛋白耦联受体→G蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→依赖cAMP的蛋白激酶A→基因调控蛋白→基因转录 在某些分泌细胞，需要几个小时，激活的PKA进入细胞核，将CRE结合蛋白磷酸化，调节相关基因的表达。 CRE（cAMP response element，cAMP应答元件）：DNA上的调节区域。 CREB：即CRE结合蛋白(cAMP response element bound protein）。 激素穿过细胞膜进入细胞与激素受体蛋白结合，然后，受体和激素的复合体转运到核中，从而激活基因转录。 （2）类固醇激素对基因调控的作用 许多生物受热诱导时能合成一系列热休克蛋白。无论细菌还是高等真核生物，热休克基因均散布于染色体的各个部位或不同染色体上。 ? 受热后，果蝇细胞内Hsp70 mRNA水平提高1000倍，就是因为热激因子（heat shock factor，HSF）与hsp70基因TATA区上游60bp处的HSE相结合，激发了转录起始。?研究发现，在没有受热或其它环境胁迫时，HSF主要以单体形式存在于细胞质和核内。单体HSF没有DNA结合能力，而Hsp70可能参与了维持HSF的单体形式。受到热激或其它环境胁迫时，细胞内变性蛋白增多，与HSF竞争结合Hsp70，从而释放HSF，使之形成三体并输入核内。 （3） 热激蛋白诱导的基因表达 热激以后，HSF不但形成三体，还迅速被磷酸化。HSF与HSE的特异性结合，引起包括Hsp70在内的许多热激应答基因表达，大量产生Hsp70蛋白。随着热激温度消失，细胞内出现大量游离的Hsp70蛋白，它们与HSF相结合，并使其脱离DNA序列，最终形成没有DNA结合能力的单体。 热激诱导的hsp基因表达 5 真核基因转录后水平上的调控 5.1 RNA前体的加工 5.1.1 各类RNA前体的加工 45S的前体rRNA：经切割、修饰为成熟的18S、28S、5.8S的rRNA。 　 tRNA初级转录产物：一般认为，tRNA基因的初级转录产物在进入细胞质后，首先经过核苷的修饰，生成4.5S前体tRNA，再行剪接而成为成熟tRNA（4S）。 　 前体mRNA（hn RNA)：经5′-加帽、3′-加尾、剪接、编辑和甲基化修饰等过程，才能成为成熟的mRNA。 rRNA前体的加工：分子内的切割和化学修饰。 rRNA化学修饰：甲基化 (原核：碱基甲基化。真核：核糖甲基化）。 5.1.2 真核蛋白质基因转录后加工的多样性 真核生物的基因可以按其转录方式分为两大类：即