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抗坏血酸(Vc)测盒说明书
QINGDAOJISSKANG BIOTECHNOLOGYCO.,LTD.
抗坏血酸(Vc)测试盒说明书
一、试剂盒组成及配置(50T/48样)
试剂一;贮备液5mlx1瓶,4℃保存6个月。
试剂一应用液配制:用时按照试剂一贮备液:双蒸水=1:14稀释,混
匀制备。
试剂二:粉剂x1支,4℃保存6个月。
试剂二应用液配制:用时一支粉剂加0.36ml冰醋酸再加水至40ml,
溶解,4℃保存。
试剂三:白色结晶体粉剂x1支,4℃保存6个月。
试剂三应用液配制:因胶南溶解,用前2-4小时加95%乙醇或无水乙
醇60ml充分溶解,制备,4℃保存。
试剂四:黄色贮备液0.2mlx1瓶,冰箱4-8℃避光保存,贮存时间6个月。
试剂四应用液配制:用时取0.15ml试剂贮备液加水至25ml制备。(先
用现配)
试剂五:液体6mlx1瓶,4℃保存6个月。
试剂六:Vc标准品:粉剂6mgx3支,每瓶内含维生素C,4℃保存6个月。
60ug/mlVc标准品应用液的配制:将1支标准品粉剂溶于10ml试剂一
应用液中,制备。
6ug/ml Vc标准品应用的配制:取60ug/ml Vc标准品应用液再用试剂
一应用液10倍稀释备用,现用现配。
注:维生素C标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制备好后在配标准,并在10分
钟内进行检测。
二、操作过程:
1、上清液制备:取样本0.15ml加1号试剂0.45ml,旋涡混匀,放置15分
钟后离心,3500~4000转/分,离心10分钟,上层清亮液体为上清液。
2、 上清液中Vc 的测定:
空白管 标准管 测定管
试剂一(mL) 0.4
6ug/ml V标准应用液(ml) 0.4
C
上清液 0.4
试剂二 0.5 0.5 0.5
试剂三 1 1 1
试剂四 0.25 0.25 0.25
充分混匀,37℃水浴30分钟
试剂五 0.1 0.1 0.1
混匀放置10分钟,1cm或者0.5cm光径,双蒸水凋零,536nm处测各管的OD值。
三、计算公式:
1、血清(浆)的计算与举例:
053258967204 .
QINGDAOJISSKANG BIOTECHNOLOGYCO.,LTD.
①、计算公式:
Vc含量 测定OD值- 空白OD值 标准品浓度 样本前处理
x x
(ug/ml ) 标准OD值- 空白OD值 6ug/ml 稀释倍数(4倍)
②、计算举例:
例1: 取许晴0.15ml,按操作表操作,测得空白管OD为0.031,标准管OD
为0.184,测定管为OD为0.144,则计算结果为:
Vc含量 测定OD值- 空白OD值 标准品浓度 样本前处理
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