核酸杂交基因芯片法检测人乳头状瘤病毒结果分析.docVIP

核酸杂交基因芯片法检测人乳头状瘤病毒结果分析[摘要]目的：分析本院就诊的女性人乳头状瘤病毒(I-IPV)感染的型别分布。方法：采用核酸分子快速导流杂交分型技术对395例女性进行HPV分型检测。结果：HPV阳性率为45.3％，在被检测到的21个HPV亚型中单一型感染占81％，以HPVl6亚型最多，占31％；混合型感染占总阳性感染的19％。HPV感染主要分布在30-49岁年龄段。三重感染及以上占3.9％。结论：运用导流杂交技术检测HPV感染具有较好的临床应用价值。及早发现高危人群，最大限度地降低子宫颈癌对妇女生命和健康的威胁。 [关键词]人乳头状瘤病毒；核酸杂交；宫颈癌 [中图分类号]R87　[文献标识码]C　[文章编号]1673-7210(2011)08(b)-084-02 人乳头状瘤病毒(HPV)是诱发女性宫颈癌及生殖器病变的主要病源。临床HPV检测对于发现宫颈癌高危患者，早期防治具有重要意义。现报道如下： 1资料与方法 1.1一般资料 选取我院2010年4月~2011年1月的宫颈脱落细胞标本395例。 1.2采集方法 将宫颈刷置于宫颈口。轻轻搓动宫颈刷顺时针旋转5圈后，放入标有患者编号的细胞保存液管中。送检。 1.3试验方法 1.3.1 HPV-DNA分离提取取保存有宫颈细胞的细胞保存液0.5ml，以14 000 rpm离心10 min，弃上清液后，利用凯普生物化学科技公司提供的基因组抽提试剂提取DNA，严格按照说明书操作。 1.3.2 PCR扩增扩增仪由上海宏石医疗科技有限公司生产的SLAN荧光定量PCR仪，试剂由潮州凯普生物化学有限公司提供。分别设阴性对照和阳性对照各1份。 1.3.3杂交试剂由凯普生物化学有限公司提供，HyBriMax医用核酸分子快速杂交仪由凯普生物科技有限公司提供。 2结果 2.1患者年龄分布 2010年4月-2011年1月笔者检测了395例HPV感染患者，其中，20-29岁18例，占4.8％；30-39岁185例，占46.8％；40-49岁175例，占44_3％；50-59岁16例，占4.1％；60岁以上1例。以30-49岁为最多。 2.2 HPV-DNA分型情况 395例患者中，检出HPV感染179例，阳性率为45.3％。单一类型感染145例，占总感染的81.0％；二种类型感染27例，占总感染的15.1％；三种类型及以上感染7例，占总感染的3，9％。见表1、2。 3讨论 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一。全球范围内其发病率在女性恶性肿瘤中排第二位。据世界范围内统计，每年约有49.3万的宫颈癌新发病例，其中，有27.4万妇女死于该病，并且83％的宫颈癌发生在发展中国家，而我国宫颈癌患病率和死亡率均占世界的1/3。同时也是我国妇女发病率最高的恶性肿瘤之一。严重威胁着广大妇女的生殖及生命健康。我国的宫颈癌发病率呈总体下降趋势但年轻患者发病率呈增加的趋势。而高危型HPV持续感染是宫颈癌发生、发展的必要条件，HPV感染与宫颈上皮肉瘤样病变(CIN)和宫颈癌(ICC)的发生、发展密切相关，它影响着CIN和ICC的病理分类和临床治疗。HPV含量与宫颈癌病变程度正相关。宫颈癌亦因而成为目前唯一一种原因明确的可以预防和治愈的恶性肿瘤。 及时正确的宫颈病变诊断和治疗对宫颈病变的转归及预后有重要影响，选择灵敏度高、特异性强的HPV的分型检测方法。是实现早期筛查的保证。本实验采用的实时荧光定量PCR技术，结合了PCR的高灵敏性和探针杂交的高特异性，利用杂交导流的原理，在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上可快速准确区分占中国人群HPV感染95％的21种类型，并在数小时内获得结果，是临床诊断和普查的理想方法。在本实验中，HPVl6及HPV58感染率最高，分别占31.0％和19.3％，这与曾维英等的报道相近。HPV 16/18型阳性率达28.1％，这可能与地区性分布有关。而在各年龄组中又以30-49岁感染率最高，占感染人群的91.1％，提示该年龄段人群应密切关注HPV的感染情况，并定期筛查。 1