液相色谱-串联质谱法分析研究阿德福韦地匹福酯的临床前药代动力学.pdfVIP

液相色谱一串联质谱法研究 阿德福韦地匹福酯的临床前药代动力学 摘要 f临床前药代动力学研究是新药开发的重要组成部分，而专属、准确和灵敏 的分析方法是其研究的基础刁，本文首次建立了测定血浆中阿德福韦浓度的液相 色谱一串联质谱(Lc／MS／I“s)法，并应用此方法对阿德福韦地匹福酯的临床 前药代动力学进行了系统的研究。 一、血浆中阿德福韦浓度的LC／MS／MS分析方法的建立． 建立了简便、灵敏、专属的Lc力ⅥS府订s法，测定动物血浆中阿德福韦的 浓度。(以9．(3．膦酸甲氧基丙基)腺嘌呤为内标，血浆样品经甲醇沉淀蛋白后， 以甲醇一水一甲酸(20：80：1，v／v／v)为流动相，采用DiamonsilC18柱分离，通 过电喷雾离子化四极杆串联质谱，以选择离子反应监测(SRM)和正离子方式 进行检测。用于定量分析的离子反应为m／z 162(阿地福韦)和m／z 274一m／z 288寸m／z 176(内标)。阿德福韦的线性范围为20—4000 ng．mL一，最低定量浓 度为20．0 ng．mL-1。样品预处理的回收率大于75％，日内、日间精密度(RSD) 小于9％，准确度(RE)在±4．5％范围内。? 二、LC／MS／MS法研究阿德福韦地匹福酯临床前药代动力学 本文采用上述的LC／MS／MS法，对阿德福韦地匹福酯的临床前药代动力 学进行了系统的研究。 阿德福韦地匹福酯的吸收动力学研究分别以三个剂量对大鼠灌胃和对猕 猴及犬口服给药，用LC／MS／MS法测定不同时刻的血药浓度。佣Topfit非室 模型计算药代动力学参数，三个剂量组的cm。。和AUC0“h值均与给药剂量成 和犬静脉给药，血药浓度数据经Topfit拟合，均符合二室模型。比较口服和静 脉给药后的AUCoa4h值，可得大鼠灌胃和猕猴及犬口服给药后的绝对生物利 捅要 2 、 用度分别为63．7％，19．6％和373％。4 ／ ， 阿德福韦地匹福酯的组织分布研究，纽织分布试验结果表明，大鼠灌胃给 药后，阿德福韦在胃、肠、胃内容物和肠内容物中含量较高，其次，在肾脏和 膀胱中的浓度较高，表明该药的主要排泄途径为’肾脏。肝脏的含量次之，表明 该药在靶器官浓度高，有利于该药抗肝炎作用的发挥。在所测试的16种组织 中，脑中含量最低，仅为血浆中药物浓度的1／20—1／10，说明该药不容易通过 血脑屏障。土 ／ 阿德福韦地匹福酯的生物转化研究，性物转化结果表明，阿德福韦地匹福 酯在胃内容物中开始主要以阿德福韦地匹福酯的形式存在，随时间延长含量逐 渐减低，2h时胃内容物中，主要存在形式为活性形式阿德福韦。肠道中和血 浆中检测不到前体药物阿德福韦地匹福酯。义 阿德福韦地匹福酯的排泄研究：以2mg·kg。的剂量对猕猴静脉给药后，72 h内有81．O±16．0％的阿德福韦经尿排出，以20 mg-kg-1的剂量对大鼠灌胃给 药后，30h内仅有不足1％的阿德福韦经胆汁排出。这表明该药主要以阿德福 韦的形式经肾脏排泄。木 阿德福韦的血浆蛋白结合率研究．队血浆中阿德福韦的浓度分别为500 ng·mL～，1000 ng·mL小时，血浆蛋白结合率分别为32．9％， ng·mL。和5000 21．2％和20．1％。 应用本法共测试了2209个生物样品，包括方法确证样品164个，标准曲 线和质控样品540卜，实际样品1505个。夫 关键词：液相色谱一串联质谱法；阿德福韦地匹福酯；阿德福韦；临床前药代 动力学