对虾先天免疫中宿主与病原互作的分子机理.PDF

一、项目名称 对虾先天免疫中宿主与病原互作的分子机理 二、申报奖种 自然科学奖-直报类 三、推荐单位 山东大学 四、项目简介 项目属于水产学领域水产生物生理学。作为海水养殖的重要的产业，对虾养 殖每年可创造超过数百亿元的产值。但常有爆发性病害发生，使养殖业蒙受巨大 的经济损失。我们针对对虾养殖中病害防控的关键问题，围绕着宿主免疫防御与 病原相互作用开展研究，在宿主免疫和病原逃逸等方面取得了系列创新性成果： 1.发现对虾重要免疫识别分子 C-型凝集素可识别细菌性病原，分别介导血 细胞对细菌的吞噬、对虾体内菌群的稳态平衡和对细菌生长的直接抑制，揭示了 C-型凝集素家族介导的对虾抗细菌免疫的多种机制。在对虾体内发现了 10 大类 模式识别受体，对它们的性质和功能进行了较系统的研究。特别是对 C-型凝集 素的功能进行系统研究：（1）揭示了C-型凝集素FcLec4 与整联蛋白相互作用 促进血细胞对病原的吞噬机理，被评价为第一次阐明了无脊椎动物 C-型凝集素 的相互作用和信号转导相关蛋白；（2）阐明了MjHeCL 通过调控抗菌肽表达保持 对虾血淋巴菌群的稳态的调控机制；（3）发现肝胰腺特异表达的C-型凝集素hsL 具有识别病原和抑菌的双重功能。 2. 鉴定了对虾RNA 干扰途径中的关键新成员并阐明它们在抗白斑综合征病 毒(WSSV)免疫中的功能及作用机制，发现了经典泛素途径通过靶向WSSV 功能蛋 白抑制感染的新功能。揭示了对虾的两种抗病毒新机制。我们的研究发现：（1） 转录激活反应RNA 结合蛋白TRBP 与真核翻译起始因子6 （eIF6）相互作用，作 为两种新成员参与对虾 RNA 干扰途径介导的抗病毒反应。（2）泛素结合酶 E2 介导WSSV 含有RING 结构域蛋白的泛素化降解抑制病毒复制。发现E2 能够结合 病毒的含有RING 结构域的蛋白，并介导其泛素化和降解，从而抑制病毒的复制。 3. 阐释了一批效应分子抗细菌和抗病毒的作用和机制：发现抑制素1 通过 结合WSSV 多种囊膜蛋白抑制感染，鉴定了多种抗菌肽，包括对虾素、抗脂多糖 因子、甲壳肽和溶菌酶等，成功进行了重组表达和初步应用。其中含单一 WAP 结构域的抗菌肽(SWD) 是一种双重功能的抗菌肽（抗菌和抑制蛋白酶活性）。该 研究已获得国家发明专利，并转让到湛江奥华水产饲料公司。 4. 发现了 WSSV 劫持宿主受体分子进入细胞，及利用宿主类泛素化（SUMO 化）系统以帮助自身复制，揭示了WSSV 逃逸对虾免疫系统的机制，提供了WSSV 防控的全新靶标。我们的研究发现，（1）C-型凝集MjsvCL 结合WSSV，并与位 于细胞膜的钙网蛋白受体相互作用，促进病毒以脂筏依赖的方式感染宿主细胞。 该研究展示了一种WSSV 入侵宿主细胞的新方式。（2）SUMO 结合酶介导白斑综 合征病毒极早期蛋白的SUMO 化修饰，作为转录因子促进了病毒基因的转录，最 终促进病毒复制。 十几年以来，我们围绕着宿主与病原互作开展了较系统的研究，在知名刊物 The Journal of Immunology 等SCI 刊物上发表论文94 篇，总计SCIE 引用1868 次。8 篇代表论文SCIE 他引177 次，单篇最高引用86 次。获得国家发明专利7 项，其中 1 项转让到湛江奥华水产饲料公司。研究工作获教育部2010 年自然科 学一等奖。 五、主要完成人情况表 1、姓名：王金星 排名：1 技术职称：教授 工作单位：山东大学 完成单位：山东大学 对本项目技术创造性贡献：提出研究的总体思路和方案，负责整个项目的 总体设计与规划、研究内容的确定、指导与实施。实验数据的分析和所有代表论 文的的撰写与修改，参与所有4 个创新点的发现与确认。是8 篇代表性论文的通 讯作者。任务来源中所有项目的主持人。是6 件国家发明专利的第一发明人。 曾获国家科技奖励情况：教育部自然科学一等奖 2、姓名：赵小凡 排名：2 技术职称：教授 工作单位：山东大学 完成单位：山东大学 对本项目技术创造性贡献： 是本项目的主要完成人。参与项目的总体设计，负责实验指导与论文修改， 是所有代表论文的共同作者。是6 件国家发明专利的第二发明人。具体贡献包括 指导和