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分支代谢途径.ppt

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分支代谢途径

碳酸盐呼吸(甲烷生成作用) 甲烷细菌能在氢等物质的氧化过程中,把CO2还原成甲烷,这就是碳酸盐呼吸又称甲烷生成作用。 CO2+4H2 CH4+2H2O+ATP 产能代谢 能量转化 底物水平磷酸化 (substrate level phosphorylation) 氧化磷酸化(oxidative phosphorylation) 光合磷酸化( photophosphorylation) 细胞物质的合成 氨基酸的合成 核酸的生物合成 糖类的合成(单糖、寡糖、多糖) 蛋白质的合成 脂类的合成 热原 系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。这里所指的“热原”,主要是指细菌性热原,是某些细菌的代谢产物、细菌尸体及内毒素。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌的产物,其次是革兰阳性杆菌类,革兰阳性球菌则较弱,霉菌、酵母菌、甚至病毒也能产生热原。 LPS—121℃,20min不被破坏 250℃,30min 或180℃、4h被破坏。 微生物合成代谢的特殊产物 毒素 细菌素 细菌产生的一种抗生代谢产物,对同源种或近似种才有拮抗作用; 蛋白质是主要成分; 有一定的作用机制(杀菌模式); 由质粒控制。 代谢调节在发酵工业中的应用 应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节 (1)对于直线式代谢途径:选育营养缺陷性突变株只能积累中间代谢产物 A a B b C c D d E 末端产物E对生长乃是必需的,所以,应在培养基中限量供给E,使之足以维持菌株生长,但又不至于造成反馈调节(阻遏或抑制),这样才能有利于菌株积累中间产物C 。 (2) 分支代谢途径:情况较复杂,可利用营养缺陷型克服协同或累加反馈抑制积累末端产物,亦可利用双重缺陷发酵生产中间产物 A B C D E F G 应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节 抗反馈控制突变株——是指对反馈抑制不敏感或对阻遏有抗性,或两者兼有之的菌株。 抗反馈控制突变株可以从终产物结构类似物抗性突变株和营养缺陷性回复突变株中获得。 目标产物 结构类似物 赖氨酸 S-(2氨基乙基)-L半胱氨酸-(AEC) 苏氨酸 ?-氨基-?-羟基戊酸(AHV) 异亮氨酸 乙硫氨酸 精氨酸 D-精氨酸 苯丙氨酸 对氟苯丙氨酸 天冬氨酸 高丝氨酸 苏氨酸 甲硫氨酸 赖氨酸 指反馈抑制 指反馈阻遏 天冬氨酸- P 天冬氨酸半醛 1 2 3 B.Flavum 抗性菌株 高产苏氨酸的代谢调节 生物素 生物素是乙酰-CoA 羧化酶的辅基 乙酰-CoA 羧化酶 脂肪酸 生物素 磷脂 膜透性 调节 青霉素 用生理学手段 —— 直接抑制膜的合成或使膜受缺损 控制细胞膜的渗透性 2. 利用膜缺损突变株 ——油酸缺陷型、甘油缺陷型 如:用谷氨酸生产菌的油酸缺陷型,培养过程中,有限制地添加油酸,合成有缺损的膜,使细胞膜发生渗漏而提高谷氨酸产量。 甘油缺陷型菌株的细胞膜中磷脂含量比野生型菌株低,易造成谷氨酸大量渗漏。应用甘油缺陷型菌株,就是在生物素或油酸过量的情况下,也可以获得大量谷氨酸。 微生物代谢调节系统的特点:精确、可塑性强,细胞水平的代谢调节能力超过高等生物。 成因:细胞体积小,所处环境多变。举例:大肠杆菌细胞中存在2500种蛋白质,其中千种是催化正常新陈代谢的酶。每个细菌细胞的体积只能容纳10万个蛋白质分子,所以每种酶平均分配不到100个分子。如何解决合成与使用效率的经济关系? 解决方式:组成酶(constitutive enzyme)经常以高浓度存在,其它酶都是诱导酶(inducible enzyme),在底物或其类似物存在时才合成,诱导酶的总量占细胞总蛋白含量的10%。 微生物自我调节代谢的方式 1. 控制营养物质透过细胞膜进入细胞 如:只有当速效碳源或氮源耗尽时,微生物才合成迟效碳源或氮源的运输系统与分解该物质的酶系统。 2. 通过酶的定位控制酶与底物的接触 真核微生物酶定位在相应细胞器上;细胞器各自行使某种特异的功能。 原核微生物在细胞内划分区域集中某类酶行使功能 与呼吸产能代谢有关的酶位于膜上; 蛋白质合成酶和移位酶位于核糖体上; 同核苷酸吸收有关的酶在G-菌的周质区。 3. 控制代谢物流向 可逆反应途径由同种酶催化,可由不同

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