病理切片制作全程质量控制实践.docVIP

病理切片制作全程质量控制实践病理切片质量事关病理诊断的准确性，其制作环节多，影响质量的因素也多。多年来我们注重做好病理切片制作的全程质量控制，优片率保持在92%以上。现将做法介绍如下。 1 标本接收 认真核对申请单与送检标本及其标志(联号、姓名、性别、科室、日期等)是否一致，符合要求者方可接收［1］，并让送标本人签字；病理技师对标本及时编号和登记。 2 固定 一是要及时 标本无论大小，离体后要立即固定(30 min内)，特别是淋巴组织固定不及时或不当，易引起自溶，出现细胞核质着色较浅、轮廓不清、程度不等的条状发白区等现象。二是要充分。固定液首选10%中性缓冲福尔马林，固定液量要完全浸没标本，大标本固定一般要在18~24 h(或以上)、小标本4~6 h。较大标本要沿最大的剖面切开、空腔脏器应剪开，淋巴结组织应沿长轴从中央做纵切面剖开，组织块不要与容器壁紧贴。固定好的标本利于脱水、透明和切片，染色不易脱片。组织块过大、过厚，固定液渗透不均匀，在固定和脱水过程中易发生变形。三是要定期检查固定液是否失效。如缺少刺鼻味或出现白色沉淀表明已失效，须更换。我们体会到，及时固定和固定充分的标本制作的切片，细胞核、细胞浆清晰，颜色鲜艳且不容易褪色；未及时固定和固定不充分的标本脱水、透明影响大，染色时容易脱片，细胞核、细胞浆模糊，组织有自溶现象，容易褪色。 3 取材 一是取材时组织块大小应适中，厚薄基本一致，形状规则。小标本取材时要用滤纸包裹，大标本取材面积通常为(1.2~1.5)cm×(1.2~1.5)cm，厚度不超过0.3 cm。组织太厚，脱水不易干净；太薄，脱水后组织容易发生变形变脆。二是清除组织周围的脂肪和剔除标本中残留的手术线等异物。脂肪过多，易引起脱水不良，致使切片困难。 4 脱水 一是脱水乙醇应逐步从低浓度到高浓度，标本不能一开始就在高浓度乙醇中进行或在无水乙醇中时间过长，否则会导致组织变硬变脆。淋巴组织及带有少许脂肪组织在95％乙醇中时间要长一些，利于组织脱水彻底［2］。二是要定期更换试剂。乙醇因挥发或者混有其他杂质，浓度变低，影响组织固定、脱水、透明、浸蜡，要根据标本量灵活掌握，最好用酒精比重计测量，既准确又节约。 5 透明 一是首选二甲苯透明。二是要掌握好时间和温度，以室温为宜，时间20~40 min，温度过低或时间过短透明不彻底，过高或时间过长组织易变脆。三是二甲苯出现絮状物时及时更换。 6 浸蜡 一要控制好蜡温。浸蜡所用石蜡熔点为56~58℃，蜡温设置应高出其溶点3~5℃，控制在60~62℃为宜。浸蜡温度过高，组织会收缩变硬变脆。二是浸蜡时间适合。第一道为软蜡(熔点45~50℃)时间为45 min，第二、三道均为硬蜡(熔点56~60℃)、时间均为60 min。时间过短浸蜡不充分(组织过软)，过长组织发硬。三要定期更换石蜡。根据标本量，逐渐淘汰二甲苯，一般为15 d更换一道。 7 包埋 一是包埋蜡温要比浸蜡温度高约3~5℃，包埋要迅速(尤其在冬天)。二是包埋时要把组织的病灶面向下；皮肤、肠管、囊壁要立埋,以保证各层组织结构都能被观察；多粒小块组织应尽量靠近并保证在一个平面上。三是选择合适的包埋盒，使蜡块上下不少于2 mm 的蜡边，左右蜡边愈少愈好，以利于连片及切片的伸展。四是要去除蜡内气体。新购包埋石蜡含有气体，往往与组织融合不好，影响切片。可将石蜡反复加温、冷却，使气体蒸发，也可溶解后放置65℃温箱内3~5 d后使用。五是病理编号要清晰。 8 切片 切片是保证质量的最重要环节，要求切片要薄(3~5um)，且厚薄均匀、平面完整、无刀痕和皱褶。一是切片前拧紧切片机各个螺旋、蜡块要足够冰冻并牢固固定、切片刀锋利无缺口。切片机震动、蜡块固定不牢、切片刀不锋利，可出现切片厚薄不均、卷起(或皱起)、断裂等现象。二是 调节好切片刀角度，刀刃与蜡块表面一般呈15~20°夹角。过大蜡片卷起，过小蜡片皱褶。三是用力要轻柔均匀，一般以每分钟转40~50次为宜。用力过大、速度过快会导致机件的震动，导致切片厚薄不均。四是注意放置蜡块位置。纤维、肌肉等组织的走向应与切片刀平行，皮肤、含包膜(或浆膜)的组织，应把较难切的部分放在上面，可以减少断裂现象。内镜、穿刺取检标本因组织细小，需切8~12个切面。切片要求完整，漂片不能有气泡和皱折，充分展平，保持水面清洁，切忌水面残留组织碎屑，以防污染。 9 展片和捞片 一是展片水温适宜。展片水温和包埋蜡的熔点有关，一般设定在42~45℃，可自如地捞片；在切片时可边切边向蜡片吹气，切片平整易于展开。二是载玻片须洁净，既能防止脱片又能提高切片清晰度。 10 烤片和脱蜡 一是烤片温度适宜。贴片后，放入