血钙测定方法学进展和临床应用.doc

血钙测定方法学进展和临床应用血钙水平与人体许多重要功能有关，包括肌肉收缩、凝血功能、物质代谢调节等。钙在人体里99%储存在骨骼和牙齿中，1%存在于血液和组织外液以及软组织中。人体血液中的钙几乎全部存在于血浆中，血钙主要指血浆钙。在多种激素（甲状旁腺素、降钙素和维生素D）的调节和控制下，血钙浓度比较稳定，维持在2.25~2.75mmol/L。血钙以离子钙和结合钙两种形式存在，各占约50%。其中结合钙绝大部分是与血浆清蛋白结合，小部分与柠檬酸、重碳酸盐等结合。因为血浆蛋白质结合钙不能透过毛细血管壁，故称为不扩散钙。柠檬酸钙等钙化合物以及离子钙可以透过毛细血管壁，则称为可扩散钙。血浆钙中只有离子钙才直接起生理作用。血钙的测定近些年也得到了快速发展，从总钙测定到离子钙测定，适应并满足了临床的应用[1]。笔者对血钙测定方法学进展及临床应用进行了归纳。 1　血钙测定方法学进展 1.1　血清总钙测定 1.1.1　乙二胺四乙酸二钠滴定法。钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合，成为可溶性的复合物，使溶液呈淡红色。乙二胺四乙酸二钠(EDTANa2)对钙离子有更大的亲和力，能与复合物中的钙离子络合，使钙红指示剂重新游离，溶液变成蓝色。从EDTA-Na2滴定用量可以计算出血清钙的含量。 1.1.2　甲基麝香草酚兰比色法。钙离子在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝结合，生成蓝色的络合物，比色波长610nm。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，以求得血清总钙的含量。 1.1.3　邻-甲酚酞络合酮比色法。邻-甲酚酞络合酮是金属络合指示剂，也是酸碱指示剂，在碱性溶液中与钙及镁聚合，生成紫红色螯合物, 比色波长575nm。与同样处理的钙标准液进行比较，以求得血清总钙的含量。在试剂中需加人8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。 1.2　血清离子钙测定　离子选择电极法是70年代发展起来的技术，离子选择电极（ISE）是一种电化学传感器，其结构中有一个对特定离子具有选择性响应的敏感膜，将离子活度转换成电位信号，电极电位随溶液中离子活度变化的关系服从Nernst方程。在一定范围内，其电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系，通过与已知离子浓度的溶液比较可求得未知溶液的离子活度。 2　血钙与临床 2.1　血钙与血液pH。血浆中的不扩散钙，虽没有直接的生理效应，但它与离子钙之间处于一种动态平衡，并受血液pH的影响。当血中pH降低时，促进结合钙解离，Ca2+增加；反之，当pH增高时，结合钙增多，Ca2+减少。因此碱中毒时，血浆离子钙浓度降低。 2.2　高血钙。血清钙大于2.75mmol/L或血清钙离子大于1.25mmol/L,即高钙血症，可使神经、肌肉兴奋性降低，表现为乏力、表情淡漠、键反射减弱，严重者可出现精神障碍、木僵和昏迷。另外心肌兴奋性、传导性降低。高钙血症还会对肾脏产生损害。血清钙大于4.5mmol/L可发生高钙血症危象，患者脱水、高烧、心律紊乱，易死于心脏骤停、坏死性胰腺炎和肾衰等。 2.3　低钙血症。当血钙低于1.75mmol/L或离子钙低于0.875mmol/L时，表现的主要症状是神经、肌肉兴奋性增高，常出现惊跳、手足抽动或震颤、惊厥等现象，并且在抽搐发作的同时还会出现不同程度的呼吸改变、心跳加快、面色发绀、严重呕吐、便血。最严重时还可导致喉肌痉挛、呼吸暂停。低钙血症常发生在外科手术之后，因此较大的外科手术（如心脏手术、肝移植等）后，需要测定离子钙，以决定是否需要补钙。 2.4　脓毒血症和肾、心、肺衰竭及烧伤患者，由于血清蛋白丧失和酸碱失衡，测定总钙已无意义，必须进行离子钙测定。肾移植后或血液透析患者，钙代谢经常改变，而且有时变化很剧烈，因此需要经常监测离子钙水平，以保持良好的心脏功能。甲状旁腺功能亢进时，离子钙浓度变化往往比总钙浓度变化更灵敏。 3　讨论 3.1　目前，临床上已经较少使用滴定法和比色法测定总钙。原子吸收法由于需要特殊仪器，操作繁琐，一般也只用于实验研究。离子选择电极法具有标本用量少，快速准确，操作简便等优点，是目前所有方法中最为简便准确的方法[2]。其特点有：①操作方便，迅速，不损及试液体系，也适于一些不宜用其他方法分析的样品，如有色或混浊样品等。②较易用于流动监测和自动化检测。③电极直接响应的是离子活度，不是浓度，故对生物、医学、化学更适合，尤其是微电技术的发展，使得在细胞内检测也已成为可能。④该法缺点是电极具有一定寿命。由于各种型号分析仪结构不同，有的是专用型（只测定离子钙），有的是组合型，可同时测定钾离子、钠离子、氯离子或pH 值，因此在操作上不尽相同，可参考各自操作说明书。 3.2　血液抽出后，溶解于其中的C02气体会释放到空气中，使血液pH变碱