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摘 要
高密度培养研究是发酵剂制备过程中重要的~环,对益生菌发酵乳制品的开
发与应用具有重要的理论和实际意义。本文以一株具有良好益生特性的益生菌三.
casei
Zhang为研究对象,从培养基及培养条件的优化、底物抑制、营养物质的补
充等方面进行研究,完成了益生菌L.casei
Zhang的高菌体密度培养及益生菌发酵
剂的制各。主要试验结果如下:
1.培养基的优化:通过单因素试验、正交试验和响应面设计得到L.casei
O.084x3‘+0.100xlx2x3—0.41xl‘X2—0.039x12x3一O.20XlX2二。
并根据此方程得到了优化培养基:葡萄糖20.99/L、大豆蛋白胨10,459/L、酵母
l∥L、MnS04·5H2054mg/L、吐温一80lg/L。三.caseiZhang在此增殖培养基中经
37℃18h培养活菌数可达到4.78x109cfu/mL。
2.培养条件的优化:通过单因素试验,得到较适培养条件为:温度37℃、摇
cfu/mL。
床转速0rpm、起始pH6.5、接种量为1×106
3.生长动力学模型的推导:在优化培养基及培养条件确定的条件下选用
Logistic
Equation作为L.caseiZhang细胞生长动力学模型,研究得出其方程为:
.,、0.0079eo·4716t
姒u2
l一(, 2, (1一eu’引埔‘)
F丽0面00—79万/忑55丽)F两
4.发酵罐发酵条件的探索:在发酵罐(3L)中研究了不同培养条件和培养方式
对L.casei
Zhang生长的影响,结果为:
培养温度:37℃
cfu/mL)
接种方式:种子液预培养10h后按7%接种(1.5,(108
搅拌速度:300rpm
中和剂g 17.5%氨水
pH值:5.9(起始pH6.5)
通气条件:间歇通氮气200mL/2h
培养方式:一次性加入补料所需营养物质
O.889/L、
MnS04·5H20
47.77mg/L、吐温一800.889/L。
在此培养基及培养条件下发酵12小时,£.casei
Zhang活菌数可达到
3,Ox】010cfu/m1.
5.L.casei
Zhang中试放大试验与菌粉的制备:在发酵罐较适培养基及培养条
发酵剂菌粉,活菌数可达4.0x1011cfu/g,活力为5.16u。
casei
关键词:益生菌Lactobacillus
Zhang;培养基优化;高密度培养;发酵剂
on Cell Culture of
Studies Density Technology
High
ProbioticL.casei
Zhang
Abstract
cultureisail linkof starter
prepares,andplays
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