珠江口14种习见水生动物体内滴滴涕含量测定方式及路径.docVIP

珠江口14种习见水生动物体内滴滴涕含量测定方式及路径 　　滴滴涕（DDT）于1874年由德国化学家宰特勒首次合成，1939年瑞士人米勒发现其具有惊人的杀虫效果。自那时起，以滴滴涕为代表的有机氯杀虫剂就开始被大量生产并使用了约半个世纪。在我国的使用始于20世纪 50年代，到70年代已占农药使用量的80%以上。从1983年起我国政府禁止生产和使用有机氯农药，但是，这些污染物质在环境中可以存留几十年甚至几百年，并能通过土壤、水体、空气进入一些生物有机体中。在中国，大多数农田土壤、江河湖泊水体、底泥和近海海域水体中都能检出DDT，但未达到污染的程度。在农作物、水果、茶叶、肉类、动物体和人体组织中均曾检出过DDT和六六六。DDTs属于持久性有机污染物（POPs），对生态系统和人类健康的危害极大，已经成为各国环境研究的重中之重。 　目前国内外对POPs的研究主要集中在沉积物[1-5]、水 [6，3]和大气 [7-8]中POPs的分布，对海洋生物中POPs的污染状况、含量及分布的研究还很少。海洋生物可以通过海水、悬浮颗粒物、沉积物和食物等途径从它们的生存环境中富集一些污染物，因此，生物体内污染物含量的高低往往反映了其所处环境相应污染物的背景水平。本研究以一些习见水产品为材料，对珠江口的海洋环境中DDTs的污染状况进行评价。研究海洋生物对有害物质的积累不仅具有科学价值，而且对保护生活在该海域的国家一级保护动物中华白海豚和保护沿海居民的身体健康也具有重要意义。 　1 材料和方法 　1.1 样品采集 　于2007年2月期间在珠海唐家湾沿岸向当地渔民收集到十几种习见水生动物，包括鱼类、贝类和虾类动物样品，每一种类所获样品质量约为0.5～1.5 kg，采集的种类见表1所示。样品放入聚乙烯塑料袋中，密封并做好标记，置于随身携带的冰盒运回实验室，鉴定种类，在冰柜中-20 ℃冷冻保存至处理。 　1.2 样品处理 　1.2.1 鱼类 先用去离子水洗涤鱼样品，然后将其置于工作台上，用不锈钢解剖刀及剪刀剪除胸鳍，除去骨头，取其皮肤、肌肉和内脏，再用去离子水冲洗干净，吸水纸吸干水分。 　1.2.2 甲壳类 虾样品解冻后，小心将其肠管道从背部取出，将附肢完全切除。用不锈钢解剖刀将腹部与头胸部及尾部分开，腹部翻下，用剪刀沿腹部外甲边缘切开后，用镊子将内侧外甲除去。用另一把不锈钢解剖刀松动腹部肌肉，并用镊子取出肌肉。用去离子水冲洗肌肉表面，并用吸水纸吸干水分，绞碎后进行匀浆。 　1.2.3 双壳类 解冻后，用不锈钢解剖刀刮去所有表面附着物后，再用去离子水冲洗每一个个体，置于磁盘上，室温下吸干样品体表水分。去掉外壳，用去离子水反复冲洗壳内软组织，并用吸水纸吸干多余水分，最后用不锈钢解剖刀取出软组织，绞碎后进行匀浆。 　1.2.4 头足类 将采集到的枪乌贼解冻，并用去离子水反复冲洗，吸干水分后用不锈钢刀具将头部和腕部分离、绞碎后进行匀浆。 　将以上各种样品的匀浆组织部分置于称量瓶中称其湿质量，然后将样品放于有盖培养皿中，再放入低温冰箱速冻，最后转入冷冻干燥仪干燥不少于72 h至其恒质量。称量样品干质量后，计算各样品的干湿比率（表2），将样品研磨成粉末状，装入5%硝酸泡过的聚乙烯封口样品袋中，密封，于干燥器中保存直至消化[9]。 　1.3 样品萃取 　样品的萃取参照AOAC[10]描述的方法进行。称取约5 g干燥待测样品，用滤纸包好，置入索氏萃取器中，加入80 mL n-hexane，在80 ℃萃取8 h。萃取液经旋转蒸发，自然风干至其重量保持恒定不变，测定其脂含量，然后加入20 mL n-hexane重新溶解，等待下一步样品净化。 　1.4 样品净化 　样品的净化过程包括两个步骤：浓硫酸净化[11]和随后的弗罗里 （Florisil） 柱净化[10]。首先将20 mL萃取液移入分液漏斗，加入八氯萘（Octachloronaphthalene，OCN）作为内标。然后缓慢地加入10 mL H2SO4并猛烈摇晃2 min，静候无机层出现并小心移去，使用H2SO4反复数次直到无机层呈无色为止。通过H2SO4清洗将碳氢化合物和其它来源于生物的有色化合物除。移出有机层并加入2%NaHSO4直到有机层的pHge;7，再将样品液浓缩至约1 mL，随后进行弗罗里柱净化。先制备弗罗里微柱：固定玻璃微管（长250 mm），用玻璃棉填塞底部，再分别相间填装双层弗罗里粉和无水硫酸钠，中间加入活性铜粉粒，先用n-hexane淋洗，然后将样品液转移通过弗罗里微柱，再加入n-hexane冲洗，使收集的样品液保持至10 mL，待测定。萃取伴生的极性化合物将通过弗罗里层析法被排除。样品在分析测定前再进一步浓缩至1 mL。 论文代写 　1.5 样品分析 　采用HP