Alport综合症临床病理分析和COL4A5基因突变的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 研究 目 的 syndrome，AS)是一种进行性遗传性肾炎，常伴有眼和耳 Alport综合征(A1poa 部异常，是由Ⅳ型胶原编码基因突变导致的一种基底膜病。Ⅳ型胶原a3～a6链编码 基因(IV a3~6 cnllagellgeneencoding AS，XLAS) 其中编码IV型胶原a5链的基因COL4A5与性连锁遗传AS(X—linked recessive 的发生密切相关，而常染色体遗传AS(autosomalinheritance，ARAS； autosomaldominant 较常见，来自美国部分地区的资料显示：AS基因频率大约为1：5000-10000。国外 肾活检标本中AS占1．6‰4％，我国的肾活检病理研究报告中0．73％1．2％的患者被 诊断为AS。AS临床表现多样，典型患者具有家族史，表现为血尿、蛋白尿、进行 性肾功能不全伴眼耳病变，但相当一部分患者临床表现极不典型，可仅表现为镜 下血尿和／或蛋白尿。国内外AS患者的临床特征也有差别，有资料显示，我国AS 患者在临床上具有蛋白尿表现较重，耳聋、眼部异常的发生率较高，青少年型较 多等特点。因此，应用有效的筛查手段，在我国不同地区开展AS筛查以逐步建立 起国内AS患者的临床资料库，具有重要的意义；而进行AS患者基因突变的研究可 以在分子水平上了解AS的发病机理、明确AS基因型和临床表型的对应关系，也能 为将来开展产前诊断和基因治疗打下基础。本研究我们首先开展AS的临床筛查， 对AS确诊和疑诊病例的临床病理特点进行分析，同时总结AS的筛查经验，初步探 讨临床上筛查AS的有效手段。并在此基础上展开AS家系的调查，对XLAS家系进 行COL4A5基因突变的检测，进一步丰富AS的基因突变库。 方 法 1、 选取我科住院患者作为筛查对象，制定筛查患者的入选条件。将肾活检光 镜下六胺银染色(PASM)着色异常作为入选条件之一，对重点病例进一步 basement 行肾小球基底膜(glomerular 免疫荧光染色(indirect 诊断标准，结合GBMIV型胶原0L链iFI结果建立AS确诊及疑诊标准，对筛查 出的AS确诊及疑诊病例的临床病理特点进行总结分析。 2、 通过一例AS先证者对其家系展开调查，绘制家系图谱；在22名家系成员中 进行临床资料与实验标本的收集。 3、 酚抽提法提取一xLAS家系中AS先证者及其母亲的外周血白细胞基因组 Genetic 应用3130 Analyser钡t]序仪对明确扩增的PCR产物进行直接测序，寻 找COL4A5基因突变。 结 果 1、 本研究共有108例患者入选进行AS筛查。在108例AS筛查病例中筛查出5例 AS确诊病例，占筛查总数的4．6％；4例AS疑诊病例，占筛查总数的3．7％。 9例确诊及疑诊病例全部具有血尿家族史，普遍对一般的对症治疗反应差。 其中5例确诊病例表现出发病年龄早、肾功能损害重、合并有蛋白尿以及耳 聋比例高的临床特点；4例疑诊病例肾功能均『F常，3例女性表现为持续性 尿检异常。 2、 行肾活检的7例AS确诊及疑诊病例肾活检病理珍断包括：轻度系膜增生性 肾小球l肾炎、微小病变及局灶节段硬化，光镜下全部具有PASM着色异常的 特点；98例行。肾活检的筛查病例中，PASM着色异常者2l例。普通免疫荧光 多为阴性，GBMIV型胶原iFI结果，男患均为阴性，女患Q3、a5链呈不连 续染色；电镜下确诊及疑诊病例GBM多呈弥漫性厚薄不均改变，2例伴有 分层、撕裂，一例女性疑诊病例表现为GBM弥漫性变薄。 3、 本研究对一例AS先证者进行的家系调