AMPK信号通路在妊娠期代谢中的初步探究.pdfVIP

AMPK信号通路在妊娠期代谢中的初步研究 摘 要 目的： 探讨妊娠合并糖尿病的处理。初步探讨葡萄糖转运蛋白4 （glucose transporter 4, 以下简称GLUT4）、磷酸化-一磷酸腺苷激活的蛋 白激酶（Pro-AMP activated protein kinase, 以下简称Pro -AMPK）与妊娠 期营养代谢之间的关系，有助于阐明妊娠期代谢相关疾病的发生机制； 同时对其引起妊娠期代谢紊乱的机制进行初步研究，本研究将有助于为 以后临床治疗妊娠期代谢相关疾病提供新的思路与靶点。 方法： （1）将200例单纯采用饮食控制,55例加用胰岛素治疗妊娠合并糖尿 病患者与41例未接受治疗患者比较妊娠结局。 （2 ）将34例胰岛素治疗孕周小于32周(A组)与21例治疗孕周在32周 以后（B组）的妊娠合并糖尿病患者比较妊娠结局。 （3）采用放射免疫法及葡萄糖氧化酶法分别检测三组妇女空腹胰岛 素（FINS ）及空腹血糖（FPG ）水平，并采用稳态模型法计算胰岛素抵 抗指数( HOMA-IR)。采用全自动生化分析仪检测血脂；依据身高以及体 重计算BMI 。 （4 ）用超高速离心法分离骨骼肌细胞膜。 （5）应用免疫印迹（western blot）检测法对15例分娩巨大儿产妇（病 例组）、15例正常晚期妊娠妇女（正常妊娠组）和13例正常未孕妇女（正 常未孕组）骨骼肌细胞膜GLUT4蛋白的表达水平进行研究。 （6）采用免疫印迹（western blot）检测法对15例分娩巨大儿产妇（病 例组）、15例正常晚期妊娠妇女（正常妊娠组）和13例正常未孕妇女（正 常未孕组）骨骼肌细胞Pro-AMPK蛋白表达水平。 （7）所有数据运用SAS 6.12统计软件进行统计学分析。采用均数t 检验，实验数据以( ±s)表示。使用相关系数分析对照组、病例组产妇 GLUT4与Pro-AMPK蛋白表达的相关性以及病例组巨大儿出生体重与 GLUT4、AMPK活性相关性。P0.05表示差异有统计学意义。 （8）所有受试对象均对研究过程知情同意。 结果： （1）55例妊娠合并糖尿病患者饮食疗法加胰岛素治疗后血糖基本控 制在正常范围内。A组的酮症、巨大儿、胎窘发生率低于B组，妊娠高血 压发生率两组相差不大，而剖宫产、早产发生率A组高于B组。 （2）正常妊娠组HOMA-IR的水平明显高于正常未孕组（P=0.002）； 血脂中血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平差异有统计学意义 （P0.05），而高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）水平差异 无统计学意义（P0.05），但都在正常范围内。 （3）正常妊娠组骨骼肌AMPK磷酸化水平与细胞膜GLUT4蛋白表达均 明显低于正常未孕组，差异有统计学意义（P0.0001）。 （4）正常妊娠组骨骼肌AMPK磷酸化程度及细胞膜GLUT4蛋白表达水 平分别与HOMA-IR呈负相关（r=-0.547,-0.540; P=0.0347,0.0379）； GLUT4蛋白表达水平与AMPK磷酸化程度无相关性（r=0.243; P=0.3824）。 （5）病例组与正常妊娠组的血脂、HOMA-IR、孕前孕晚期 BMI、孕 期体重增长比较均无统计学差异（P0.05）；两组产妇骨骼肌细胞膜GLUT4 与AMPK活性比较均无统计学差异（P=0.5132;P=0.9076）；巨大儿出生体 重与骨骼肌细胞膜GLUT4水平、AMPK活性无相关性（r=-0.1423,-0.0948; P=0.6130,0.7369）。 结论： 对妊娠合并糖尿病患者，在饮食控制基础上及时加用胰岛素治疗可 以改善母婴结局，但效果不显著。 妊娠可能抑制葡萄糖利用的AMPK信号通路，降低AMPK活性及GLUT4 细胞膜转位从而参与妊娠期胰岛素抵抗的发生。 AMPK活性、GLUT4膜转位抑制可能不是巨大儿的产生原因，AMPK信 号通路可能同巨大儿的产生机制无关。 关键词： 妊娠合并糖尿病，胰岛素，GLUT4，AMPK，妊娠期代谢， 巨大儿 THE STUDY OF AMPK SIGNALING IN METABOLISM DURING G