AngⅡ及VEGF在糖尿病视网膜病变大鼠模型中的表达及其相互关系.pdfVIP

·中文论著摘要· II和VEGF在糖尿病视网膜病变大鼠模型中的表 Ang 达及其相互关系 目 的 糖尿病视网膜病变(diabetic 一，最新的研究表明，眼部组织具有独立合成肾素一血管紧张素系统 (renin--angiotensin II和VEGF在糖尿病视网膜病变大鼠中 通过建构糖尿病动物模型，观察分析Ang II与DR发生发展的关系。 的表达及其相互关系，探讨Ang 方法 健康雄性Sprague 缓冲液。建模成功后，分别于4、8、12w各处死糖尿病组及正常对照组大鼠15 只，制作视网膜组织切片并采用HE染色法观察视网膜形态学改变，采用免疫组 II)和血管内皮细胞生长因子(VEGF) 织化学法检测视网膜血管紧张素II(Ang II和VEGF 在各组大鼠视网膜内的定位表达，采用Westernblot检测视网膜Ang II mRNA的表 蛋白的表达，采用Real．time mRNA和VEGF PCR测定视网膜Ang 检验和Pearson相关分析进行统计学分析，以P0．05作为差异具有统计学意义。 结果 1、一般观察：糖尿病组大鼠呈现明显多尿、多饮、多食，明显消瘦、弓背， 精神逐渐萎靡，毛皮污秽无光泽，早期多动，后期反应迟钝，生长缓慢，血糖波 动在较高水平(16．7mmol／L)。 2、视网膜光镜形态学观察：糖尿病4w组与正常组相比较无明显改变；糖尿 病8w组视网膜节细胞层及内外核层细胞排列紊乱；糖尿病12w组可见视网膜节 细胞层及内核层水肿，细胞排列紊乱。 3、免疫组织化学结果显示：正常组与糖尿病组大鼠组视网膜神经节细胞层、 内核层均有AngII和VEGF阳性表达，糖尿病组大鼠阳性表达更为明显。 4、Western II蛋白 blot结果显示：正常组与糖尿病组大鼠视网膜中均有Ang II蛋白在正常 表达，组间比较差异有统计学意义(，=4357．00，尸=0．oo)。Ang 对照组视网膜中表达微弱，而在糖尿病模型组视网膜中表达显著上调，与正常对 照比较差异有统计学意义(P=0．00)；正常组与糖尿病组大鼠视网膜中均有VEGF 正常对照组视网膜中表达微弱，而在糖尿病模型组视网膜中表达显著上调，与正 II和VEGF蛋白的表达呈明显正相关(，．=0．83，P=0．00)。 膜病变中，Ang 5、Real．time II和VEGF的表达， PCR结果显示：正常大鼠视网膜有Ang II和VEGF表达上升(Po．05)， 8w、12w)，DM组与NC组相比视网膜组织Ang II 视网膜病变中，AngmRNA和VEGFmRNA的表达呈明显正相关(，=O．81，P =0．00)。 结 论 1、在糖尿病大鼠模型下，视网膜形态学明显改变在患病后8w即可发生。 II和VEGF明显表达于视网膜神经节细胞层及内核层细胞。 2、Ang 3、Ang 峰值。 II 4、Ang 到峰值。